Structura centrelor active ale anticorpilor. Studiul site-urile active ale imunoglobulinelor

HSIA și Piette folosind monovalente și bivalent etichetate spin haptenele DMF Am investigat adâncimea și eterogenitatea situsurile active ale anticorpului anti-DNP iepure. Ei au studiat dependența corelării marcată de spin monovalent DFT-haptenă legat la situsul activ al anticorpilor de la Ha + 1Ds d, In - lungimea haptenei, d - distanța dintre haptenă și etichetă, care poate fi modificat prin creșterea lanțului hidrocarbonat între ele.

Dacă modificați Ha + d de la 10 la 12 A Autorii au observat o scădere bruscă a timestamp-ul de corelare, care este apoi schimbat puțin. Această scădere se datorează faptului că Ha + d în intervalul de mai sus depășește adâncimea zonei active și eticheta, lăsând devine capabil să se rotească liber. Rezultă că adâncimea situsurile active este de 10-12 A. Rezultate similare au fost obținute în experimente cu haptene bivalente.

Adăugată la anticorp haptene bivalent în exces spectru VSH observată este puternic imobilizat prin formarea de anticorpi dimeri sau trimeri. Lungimea minimă a haptenei bivalent, prin capacitatea de a lega două molecule de anticorpi au rămas încă, a fost egală cu 21 A. Evident, adâncimea minimă a centrului activ este de 10,5 A.

dimensiuni Anticorpi centrilor activi, Se pare să depindă puțin de specificitatea speciei. Astfel, folosind aceeași metodă creșterea constantă distanța dintre DFT și eticheta de spin, sa demonstrat că adâncimea centrelor active ale chick anti-DFT-anticorpilor și IgA mislomnyh murine MOPC 315 având o mare afinitate pentru DNP este de 10 ± 1 A. Un alt grup de autori explorarea centrului Fv-fragmsnta structura proteinei MOPC 315 de haptene marcate cu spin, a ajuns la același rezultat.

Astfel, informația de activă profunzime centre anticorpi, obținut prin eticheta de spin, sunt în concordanță cu analiza cu raze X.

haptene marcate cu spin au fost utilizate (Willan e un 1977..) pentru un studiu comparativ al situsurile active ale următoarelor dimensiuni mislomnyh IgA anti-DNP activitate: MOPC 315, 460 și SIDS XRPC 25. Analize de complexe imune spectrele RPE ale DNP marcate spin și unii dintre derivații săi Având în vedere aceste haptene stereochimiei au condus la următoarele concluzii. Adâncimea centrelor active ale celor trei IgA identice (11 - 12 A), dar există diferențe în dimensiunile transversale ale centrelor de la intrare.

Pentru XRPC 25 această dimensiune este 7,5X8 A pentru MOPC 460>10X 11 X A „și pentru SIDS 315B>8h11A. Toate cele trei proteine ​​au site-uri de legare lantanndov La III și Gd III. Interacțiunea dintre aceste site-uri și centrele de activ. MOPC 160 și distanța 315 dintre metal și grupul etichetat spin-haptena N-O aproximativ 10 A, și XRPC - 25-20 A.

rezonanță magnetică nucleară (RMN), rezoluție înaltă (270 MHz) a fost aplicat de către același grup de autori pentru a studia site-ul activ Fv-fragment de MOPC 315 (Dower e. A., 1977). Calcule specifice posibile pentru a determina geometria situsului activ în conjuncție cu haptena DNP care formează van der Waals interacțiune cu patru aminoacizi aromatici centrale.

Sa constatat că benzile din spectrul RMN, fenilalanină sau tirozină resturile corespunzătoare, extinde în prezența haptenei. Explicația cea mai probabilă pentru aceasta - scăderea mobilității resturilor care pot corespunde fluctuează cu o frecvență de aproximativ 104 Hz.