Imunizarea împotriva infecției cu celulele dendritice. Eficiența activării imunității înnăscute

În continuare a fost studiată capacitatea celulelor dendritice singenice induce o protecție specifică împotriva infecției în modelul K. pneumoniae K2. DC au fost obținute din măduva osoasă a șoarecilor prin metoda descrisă mai sus, în ziua a 7 cultură au fost adăugate DC lizat K. pneumoniae K2 (50 pl / ml) și 20 ng / ml TNF-a. In ziua a 9-a DC au fost spălate și șoarecii imunizați CBA.

soareci imunizat în diferite experimente, 4, 3 și 2 ori cu un interval de 2 săptămâni. In DCs experiment 1st au fost injectate subcutanat pe 2,5-3,0h106 celule în 0,5 ml, în a 2-a de experiment și apoi - același număr de celule au fost administrate de 3 ori subcutanat sau intraperitoneal. Activitatea imunogen celulelor dendritice pulsate K. pneumoniae lizat K2 a fost determinată prin infectarea intraperitoneală a tulpinii virulente șoareci K. pneumoniae K2 la o doză de 100 celule microb într-un volum de ml de 0,9% soluție de clorură de sodiu 0,5. Șoarecii au fost provocați la 14 zile după ultima vaccinare, DC Experiența escortat doza infecție de control la șoarecii nevaccinati. Observarea animalelor a fost efectuată timp de 10 zile (moartea șoarecilor a fost oprit în ziua 7 după infecție).

mature DCs, K. pneumoniae lizat în impulsuri, cu acest mod de imunizare și șoarecilor infectați la 14 zile de la moarte avertizate doză letală de infecție omoloage 83,3-100% din cazuri cu animale 100% de control ucide, în timp ce DC imature cu aceeași configurare experimentală nr posedă date privind activitatea de protecție obținute indică posibilitatea formării răspunsului adaptativ (specific) imun sub influența DC tratat cu antigenul omolog.

următoarele experimente pentru a studia efectul specific Proto voinfektsionnogo celulele dendritice maturate sub influența diferitelor antigene: lizat K. pneumoniae K2 (50 pl / ml), TNF-a (20 ng / ml) și Immunovac-VI-4 (25 ug / ml), schema imunizarea DC a fost redusă la două administrări la 14 zile și provocați cu șoarecii K. pneumoniae K2 la o doză de 25-50 celule microbiene.

mature DCs, K. pneumoniae lizat K2 încărcate (cu TNF-a și fără TNF-a), cu imunizarea dublă asigurată protecția șoarecilor în 100% din cazuri, comparativ cu 20% dintre șoarecii care au supraviețuit în controlul. In timp ce DC maturizat sub influența doar TNF-a, nu a protejat șoarecii de doze letale de infectie ca DCs maturate prin acțiunea Immunovac-VP-4, cu condiția ca efect protektivnyi în 33,3% din cazuri. În acest test, a primit, de asemenea, date care numai DC încărcate antigene omoloage, a avut un efect semnificativ protektivnyi identificat de către noi, în 14 zile de la imunizare. Aceasta demonstrează capacitatea celulelor dendritice care prezintă antigene la limfocite T, care fac diferența în celule efectoare specifice.

rezumând de mai sus, trebuie remarcat faptul că funcția prezentatoare de antigen DCs este de asemenea instalat în infecții șoareci de model. Anumit Activitatea protectoare împotriva K. pneumoniae K2, cele testate 14 zile după administrarea de 2-4 ori DC format numai DC încărcat cu antigen omolog. Mature DCs folosind maturarea ca inductor Immunovac-VP-4, dar care nu sunt încărcate cu antigenul pentru a asigura o protecție redusă această perioadă, probabil datorită prezenței antigenelor reactivitate încrucișată în compoziția componentelor antigenice Immunovac VP-4.

Activarea imunității înnăscute și capacitatea de a crea o protecție împotriva agentului patogen necunoscut este indicat pentru administrarea simultană a șoarecilor de mature și imature DC, și ca un agent patogen necunoscut K. pneumoniae K2.

Faptele experimentale, confirmând ipoteza ca activarea imunitatea înnăscută imunomodulatori de origine bacteriană, sunt agoniști ai TLR, aceasta conduce la o dezvoltare rapidă a rezistenței la agenți patogeni heterologe. Când infecția typhimurium S imunizat o dată Immunovac-VP-4 soareci a relevat o creștere semnificativă a duratei de viață în comparație cu animalele intacte.

Investigarea citokine profil vaccinați Immunovac-VP-4 șoareci au arătat deja după 0,5 ore de la administrarea EP4-o creștere a expresiei IL-10, IL-6, 4 ore după creșterea producției de IL-12, IFN-y. După infectarea acestor șoareci S. typhimurium a indicat o rezistență completă timp de patru zile (la momentul respectiv până la moarte de 85% din șoarecii intacte) și slab în același timp expresia citokinelor.