Principiile de bază ale diagnosticului prenatal citogenetic.

În prezent, problemă de diagnosticare citogenetice

Avantaje și dezavantaje ale analizei citogenetice atunci când se utilizează diferite metode de obținere a preparatelor cromozomiale din probele fetale ale materialului sunt prezentate în Tabelul.

Utilizarea în cele mai multe centre complexe citogenetice și metode de diagnostic citogenetice moleculare oferă cele mai complete informatii despre cariotip fetale în diferite stadii ale dezvoltării fetale.

Video: Studii citogenetice. Biopsia de vilozitati corionice avortului ratat

Când karyotyping prenatale Ar trebui să fie ghidate de principiile analizei cromozomilor droguri acceptate la nivel internațional citogenetice clinice și aprobate de către Ministerul Sănătății, precum și normele de nomenclatură care descrie internaționale carnotit.

Caracteristici Analiza citogenetică a celulelor diferite origini fetale celule de lichid amniotic Celulele AF sunt reprezentate de mai multe tipuri de origine diferită:
- celulele membranei amniotic (de fapt, amniotice)
- Celulele epiteliale fetale (epiderm, gastrointestinale, genitourinare și ale tractului respirator, cavitatea bucală mucoasei).

Video: Parent Club (25.11.2015 - Partea 1)

Compoziția calitativă și cantitativă Celulele AF și concentrația de celule viabile au o variabilitate individuală și depinde de stadiul de dezvoltare. Optim pentru cercetare citogenetică este amniotic epiteliului - proliferează activ clona de celule specifice pentru o anumită cultură. Identificarea Între timp precisă a tipurilor de celule capabile de diviziunile mitotice și klonoobrazovaniyu sub culturi de celule in vitro, foarte dificil.

Cel mai adesea pentru cultivarea Celulele amniotice folosite obținut într-o perioadă de 15-18 săptămâni de sarcină. Utilizarea în acest scop amniotice mai devreme (12-14 săptămâni de gestație) sau mai târziu (după 20 de săptămâni de sarcină) termeni este posibil, în principiu, ci ca o regulă, în mare măsură complică și lungește procesul de diagnosticare, crește numărul de încercări nereușite.

cultivarea celulelor standard AF include următoarele etape: stabilirea culturii, subcultura, tratamentul hipotonic și fixarea. În ciuda utilizării pe scară largă a culturilor celulare de AF din lume, o tehnică comună pentru preparatele cromozomiale sunt inexistente. Pentru cultivarea celulelor AF folosesc două abordări principale care diferă în metoda de producere a coloniilor și metodele de fixare.

Video: o nouă generație de secvențiere: principii, posibilități și perspective - Maria Logacheva

1. Flaconul a -Metoda-cell cultură Pacienții în suspensie și monostrat de fixare a culturii după tripsinizare. Testul este realizat în două din trei culturi (10 metafaze per probă). În cazul în care toate plăcile metafază observat același cariotipului, se stabilește diagnosticul. În cazul unei singure metafaza cu un cariotip aberant (structural sau numeric) a fost analizat a treia cultură de rezervă. În cazul în care una și aceeași aberație cromozomială este determinată de mai mult de o metafaza dintr-o sticla, dar nu a fost confirmat în alte sticle, diagnosticul „psevdomozaitsizm“. În cazul în care aceleași anomalii cromozomiale la mai mult de o sticla, diagnosticul este stabilit „mosaicism true“.

2. Metoda in situ - cultivarea și fixarea celulelor pe lamele în vase Petri sau sticle speciale - slide-uri. Analiza a fost realizată pe plăci metafază din cele trei feluri de mâncare de cultură (un total de 10 colonii analizate). Când detectarea clona anormale analizate vsekultury. aberații cromozomiale observate într-un singur pahar, indică „psevdomozaitsizme“, mai mult de o - „adevărata mozaigshzme“.

amniotice standard de proces de cultivare de la primirea modelului până cariotiparea ia o medie de 14-21 de zile. Dezavantajele sunt costul ridicat al bulionul de cultură și echipamente, ceea ce este important pentru laboratoarele interne, precum și mare (cu 2%), probabilitatea de contaminare a probei de celule maternali.

În ultimii ani, ea a dezvoltat o nouă abordare a Analiza cromozomială a celulelor cultivate. «Pipett» Metoda se bazează pe izolarea mikromanipulyatsionnoy metafaznyhiprometafaznyhkletokiz Caracteristici ihmorfologicheskim Culturi nesuspenzionnyh datorate și slăbirea datorită substratului. Tratamentul hipotonic în continuare și de fixare sunt efectuate pe celule singure. Această metodă reduce perioada de cultură la neskolkihdney și, cel mai semnificativ, reduce riscul erorilor de diagnostic cauzate de ambele mosaicism și contaminarea probei. prometafaza Pregătirea și plăcile metafază în acest mod pot oricăror culturile primare și transplantate. Din păcate, echipamente scumpe și de muncă împiedică adoptarea pe scară largă a acestei metode progresive în practica clinică.