Diagnosticul de blastomeres izolate. Patologie de diagnosticare la stadiul de blastocist.

Diagnosticul de blastomeres izolate Acesta vă permite să obțineți informații exacte cu privire la genotipul fetal. Practic 1-2 blastomere biopsie este efectuată la etapa 8-10 embrioni per celulă. Deoarece etapele timpurii ale zdrobire tuturor blastomeres totipotent (adică interschimbabil), eliminând câteva celule nu afectează dezvoltarea ulterioară a embrionului. Analiza metodica a blastomeres singulare din embrioni de prinschEgshalno nu diferă de analiza corpurilor polare.

Selectarea diagnostic molecular determinată de mutația specifică investigate și include atât PCR pentru detectarea simultană a mai multor mutații (multiplex PCR) și tehnici ADN mai complexe. Utilizarea lor permite de a diagnostica cele mai comune autosomal boli recesive monogenice - fibroza chistica, talasemia, atrofie musculară spinală, Tay - boala Sachs si autosomal dominanta - distrofia miotonică, sindromul Marfan, coreea Huntington și X-legate - sindromul distrofia musculară Duchenne și fragile X-cromozom.

Diagnosticul de preimplantare citogenetice efectuat pentru 1-2 blastomeres FISH metodă folosind sonde ADN specifice regiunilor pericentromerica de cromozomi 16, 18, 21, 13, X, Y. In cazul heterozigoți transportatorului translocare unul tentativelor părinte tselnohromosomnyh folosind sonde ADN.

geteroploidii diagnostic problemă complicată de frecvența mare a mosaicism cromozomiale în stadiile incipiente ale embriogenezei umane. S-a arătat că 38-46% embrioni morfologic normale pe scena de celule 8-10 au trei sau mai multe blastomeres aneuploid. Numărul de blastomeres, care diferă prin numărul și un set de cromozomi, se poate ajunge la jumatate din toate celulele germinale. Deoarece concluzia bazată pe analiza 1-2 celule care nu reflectă pe deplin statutul cromozomial al datorită frecvenței ridicate de segregare cromozom anormale în timpul strivire zigot probabilitatea de eroare de diagnostic este mare formatoare de embrion. Prin urmare, DD poate fi recomandată în cazurile cu risc ridicat (25-50%), nașterea unui copil cu o boală ereditară.

Diagnosticul la stadiul de blastocist Este una dintre cele mai promițătoare domenii de DD. La embrionul stadiul de blastocist este format din aproximativ 60-100 celule. Când redarea trofo- embryoblast și fără a prejudicia dezvoltarea embrionului pot fi eliminate pana la 10 celule trofoblastice. Rețineți, totuși, că cultivarea in vitro a embrionilor in fertilizarea in vitro (FIV), rareori sunt aduse la stadiul de blastocist, deoarece capacitatea acestor embrioni pentru implantare poate fi redusă substanțial. În același timp, frecvența embrionilor normali morfologic formă mozaic de aberație numerică cromozomială este suficient de mare și ajunge la 40%.

Astfel, principalele (și numai) avantajul diagnosticul de preimplantare este posibilitatea transplantului de embrioni genetic de grad înalt. Dezavantajele acestei abordări sunt: ​​dificultățile metodologice asociate cu necesitatea de a lucra cu cantități microscopice de material, limitând domeniul de aplicare al programelor de diagnostic WKÖ și o probabilitate mai mare de misdiagnosis din cauza complexitatea analizei celulelor unice. Perspectivele pentru analiza unui număr mare de celule, desigur, va crește DD metode de soluționare. Cu toate acestea, chiar și în analiza cromozomiala de celule multiple probleme mozaicismul trofoblast rămâne nerezolvată, și, prin urmare, nu exclude necesitatea luării unor măsuri pe PDP etape după implantare.

În concluzie, observăm două situații principale constrângătoare dezvoltarea de diagnosticare pre-implantare în Rusia. În primul rând, aceste studii, chiar și în cele mai dezvoltate centre naționale ale tehnicilor de reproducere asistata sunt încă în stadiul de dezvoltare științifică. Aceasta înseamnă că, după DD și debutul sarcinii mult asteptata dupa transplant operat embrioni post-implantare în etapele recomandabilă PD metode standard.

În al doilea rând, diagnostic pre-implantare este imposibilă fără prezența echipamentelor de înaltă precizie pentru studii moleculare și citogenetice, tehnici precise pentru operațiunile de ovule microchirurgicale și blastocite, specialiști de înaltă calificare - citogenetică, biologi moleculare și embryologists și, desigur, speciale reactivi de înaltă calitate, inclusiv cromozomiale și sonde ADN locusului specific și consumabile materiale. Ca rezultat, DD, desigur, crește foarte mult costul deja ridicat de FIV și face inaccesibile pentru poporul rus.