D-dimer: ce este norma

Acțiunea complexului enzimatic de t-PA-plasminogen a produs o enzimă capabilă de a distruge cheagul de fibrină, - plasmina. În timpul degradării fibrinei, realizată această enzimă cheie în sistemul fibrinolitic al protofibrils (D = D-E-D = D-E-D = D) sunt separați D-dimerii (D = D) și fragmentele E (E-). Deoarece D-dimer sunt D-D-link-uri (cross-linking), care sunt absente în fibrinogen, monomer de fibrină și polimer fibrină în vrac, crescând concentrația acestuia în sânge indică realizarea activării coagulării și fibrinolizei.

Principiul metodei

Principiul metodei ELISA se bazează pe legarea specifică D-dimer anticorp monoclonal pe suprafața microplacă. După îndepărtarea substanțelor nelegat la microplaca, incubate cu anticorpul marcat cu enzimă (conjugat). Ca rezultat, pe suprafața microplaca se produce anticorpi aderare etichetează cu enzime complexe la existente D-dimer-anti-O-dimer. Adăugat după spălare 3,3`, 5,5`-tetrametilbenzidină permite evaluarea activității enzimatice de colorația caracteristică a amestecului de test. Intensitatea culorii este proporțională cu activitatea enzimei și, în consecință, cantitatea de analit din probă.

Reactivi și echipament

• conjugat Enzyme (anticorp de iepure sau capră conjugat cu peroxidază de hrean).
• Microplaca acoperit cu gaura anti-D-dimer.
• Calibrator / calibratoare.
• tampon probă.
• Tamponul de spălare.
• O soluție de cromogen / substrat (cromogen - tetrametilbenzidină, substrat - peroxid de hidrogen).
• Soluție de oprire (0,5 M acid sulfuric).
• Echipament pentru efectuarea ELISA (mașină de spălat, cititor pentru tablete și altele.).

Distribuitor kit de diagnostic de reactivi - CJSC "BIOHIMMAK".

Probele de sânge pentru cercetare

Ca probă pentru determinarea concentrației D-dimer, utilizarea stabilizata de sodiu în plasmă de sânge integral citrat. Caracteristici de preparare a probelor examinate în detaliu în anexa 3.

Video: Creșterea D-dimer cu FIV (? Are implantare de e-dimer)

Metode de determinare a

Reactivii incluse cu kit, iar placa înaintea testului trebuie să fie la temperatura camerei. Secvența de acțiuni un medic de laborator pentru determinarea nivelului de D-dimer trebuie să respecte cu strictețe instrucțiunile de kit de reactiv.

Video: markeri cardiaci analizor Express si D-dimer RAMP Reader

Rezultatele evaluării studiului pentru a măsura concentrația de D-dimer este necesară utilizarea curbei de calibrare. Calibratoare în dublu exemplar, se recomandă să exploreze definițiile, precum și a construi o nouă curbă de calibrare pentru fiecare nou kituri de diagnostic. Pentru a stabili curba de calibrare folosind valorii absorbanței obținute în detectarea diferitelor concentrații de D-dimer.

Trebuie subliniat faptul că, la momentul scrierii monografiei universal acceptată nici un standard de D-dimer, astfel încât producătorii utilizează o varietate de kituri de diagnostic și mostre ale unităților pentru determinarea acesteia. În plus față de conținutul tradițional indicații în greutate pe unitatea de volum (mg / l ng / ml, ug / ml, mg / l, nmol / l), un număr de producători de kituri sugestii de diagnostic de determinare a D-dimer evaluate în unități echivalente cu fibrinogen (FEU mg / L).

Video: Lubrifiere unelte de polizor (LBM)

Această caracteristică este foarte indicat, deoarece în diferite variante de prezentare a rezultatelor cercetării apare concentrație (mg / ml), iar intervalul normal și rezultatele pentru determinarea diferitelor unități de măsură diferă cu aproximativ 2 ori. De multe ori, din cauza lipsei unor standarde uniforme, diferențele în fundalul multor stări patologice (DIC, embolism pulmonar și multe altele), atunci când se utilizează diferite opțiuni pentru exprimarea rezultatelor diferă cu mai mult de 2 ori.

Formula de calcul a rezultatelor determinarea concentrației D-dimer în unități SI: [nmol / l] = [pg / ml] x 5476. Unitățile de greutate cel mai frecvent utilizate corespund reciproc, după cum urmează: 250 ng / ml = 0,25 ug / ml = 0,25 mg / l = 250 g / l.

Intervalul normal de concentrație de D-dimer trebuie determinate în fiecare laborator cu caracteristicile echipamentului și consumabilelor. Niveluri normale ale D-dimer, specificate de către majoritatea producătorilor este mai mică de 250 mg / L, mai mică de 0,5 mg / l FEU. Deoarece perioada de înjumătățire a D-dimer este mai mult de 24 de ore, nivelul său este stabilă suficient de lung.

Evaluarea rezultatelor testelor trebuie efectuate ținând cont de definiția corectitudinii. Pentru a controla calitatea fiecare dintre laboratoarele de control propuse pentru a utiliza materiale cu unitățile recomandate de producător.

Interpretarea rezultatelor sondajului

Determinarea concentrației de D-dimer este adesea utilizat pentru detectarea trombozei și a tromboembolismului. Specificitatea acestui indice în ceea ce privește tulburările trombotice este limitată, deoarece acest indice crește, iar la multe alte stări patologice.

În ciuda specificității limitată a unui test, este foarte mare de informații tromboza de conținut și tromboembolismul, deoarece testul demonstrează un foarte bun nivel de prognostic negativ, adică. E. Un rezultat negativ este aproape întotdeauna o dovadă a absenței unor procese tromboembolice.

Nivelurile ridicate de D-dimer trebuie interpretate luând în considerare rezultatele altor teste și bolii clinice. Acest indice este, de asemenea, utilizat pentru a evalua eficacitatea antitrombotic terapiei.

Alte tehnici analitice In plus ELISA pentru determinarea D-dimer utilizate și alte tehnici imunochimice (immunoturbidimetry, immunohemilyuminestsentsiya, aglutinare latex, imunocromatografie, imunodifuzia membranei). Pe piață sunt reprezentate pe larg metode semicantitative de determinare a acestuia. Multe modele moderne de coagulometre automate și semi-automate capabil de a cuantifica nivelul de D-dimer folosind immunoturbidimetry.

Cauzele erorilor

• Nerespectarea modului de depozitare a temperaturii.
• Încălcarea procedurii de spălare (pentru spălare manuală trebuie spălate de cel puțin 3-4 ori). După spălarea plăcii de scurgere de pe hârtia de filtru ca lichid, de obicei rămânând în godeuri după spălare, poate interfera cu substratul inferior și densitatea optică a probei.
• Amestecarea reactivilor din loturi diferite.
• Condensul sondelor. Pentru a preveni apariția condensului nu trebuie să deschidă ambalajul până atunci, până când se încălzește la temperatura camerei.