Analiza citogenetică a celulelor villus corionice ale placentei.

Celulele villos corionice

Video: metode de cercetare citogenetica

pentru Analiza cromozomială a celulelor corionică sau placenta, folosind două metode de bază.

1. cultivare pe termen lung în cultură monostrat. Ca și în cazul celulelor AF de analiză, există un număr mare de modificări cultivare a celulelor villus corionice. Pentru mai multe informații despre ele pot fi în literatura de specialitate. Menționăm că numai culturile primare sunt în creștere compoziției celulare eterogene cu o creștere predominantă de celule stromale mezenchimale similare fibroblastelor vilozităților. Formarea de colonii sau monostrat vrac apare de obicei la 10 până la a 12-a zi de cultivare. Principiile de bază ale analizei culturilor celulare de vilozități corionice și interpretarea rezultatelor sunt similare cu cele ale AF culturi de celule.

2. medicamente „directe“ Villi corionice. Metoda de analiză formulări „directe“ pe baza unui studiu de celule cytotrophoblast spontan fisionabile fără cultivare prealabilă. Primele medicamente de țesut vilozități corionice conținând placa metafaza calitate satisfăcătoare, fără utilizarea grupului de culturi de celule au fost obținute de cercetătorii Milanese condus G. Simoiii. În anii următori, s-a propus diferite modificări ale metodei, care zatragshzayut toate etapele prelucrării vilozităților. Substanțial toate variantele metodei pot fi împărțite în două grupe:
- real „direct“, bazat pe termen scurt (de 2-3 ore) înainte de preincubări vilozități nativ tratament hipotonic și fixare;
- "semidirect„Presupunând creșterea timpului de incubare a vilozităților native în medii de cultură cu suplimente de substanțe nutritive 24,48 sau 72 de ore.

În ciuda simplității aparent, aceste metode oferă rareori rezultate consistente și, prin urmare, tind să fie folosite în legătură cu cultivarea. dezavantajele tipice ale metodei directe descrise exemple de realizare sunt un număr mic de plăci metafază pierderi artefactelor cromozomilor în timpul probei macerarea în acid acetic și un mic de fitness de cromozomi în diferențiale colorării de referință cu Giemsa. Numărarea numărul de mitoze pe „directe“ și „semi-rânduri» Preparatele au arătat că la vilozități de incubare 2- 3 zile activitatea mitotică a celulelor cytotrophoblast este mai mare decât la o incubare de 2 sau 24 de ore. Acest lucru sugerează că, la momentul de celule de biopsie se confrunta cu „șoc“, care interferează cu parametrii ciclului celular și mitozei vstupayutv.

am dezvoltat propria metodă de modificare directă - metoda de „scuture-off-amprentare“ și metoda de repede inainte. Utilizarea unor doze mari de colchicina cu procesarea simultană într-o soluție hipotonă permite obținerea de medicamente din CVS / placenta in timpul sarcinii de la 10 la 20ned care satisfac toate karyotyping criterii. În combinație cu metode de colorare fluorescente diferențialului cromozomilor eficacitatea acestor metode este mai mult de 99%.

Video: Vision Cyto - metode tradiționale de analiză citologică

Ar trebui subliniat faptul că acestea sunt adecvate pentru modificarea preparate cromozomiale alimentară din țesuturi cu o mare activitate naturală mitotice, inclusiv orice țesuturi și organe ale embrionului. nuclei întrefaze, tratate în acest mod sunt destul de potrivite pentru FISH metodă cu sonde ADN specifice, ceea ce este important în verificarea diagnosticului citogenetic prenatal. Metode detaliate de realizare formulare și colorare diferențială descrise anterior.

eficiență ridicată, viteză și fiabilitate la cel mai mic cost cu condiția introducerea rapidă a acestor modificări în diferite centre de diagnostic prenatale în Rusia și țările CSI.