Prepararea osteoprogenitornogo altoi in vitro

Scopul cercetării: pentru a proiecta transplant osteoprogenitor tridimensional in vitro.

Materiale și metode. Ca schelele de diferite linii celulare utilizate probele de hidroxiapatita, vitroceramică, matricea osoasă demineralizata spongios și cortical, biotmate rial «Osteomatryks» ( «Konektbyofarm», Rusia). Metoda de cultivare celulară a fost utilizată pentru izolarea și extinderea multipotential mezenchimale stromale cellss culturi (MMSC) și celule derivate din periost (PDC). Înainte de însămânțare cell`s pe suporturi de MMSC au fost induse să se diferențieze pe tehnologia dezvoltat și patentat de către noi. Metoda membranelor plasmatici etichetare de vopsele intravital Fluoreccent Green PKH67 și Red PKH26 ( «Sigma», SUA) a fost utilizată pentru îmbunătățirea vizual căutarea după localizarea celulelor pe suprafețele scaffold`s. Metoda citochimic a fost utilizată pentru detectarea activității fosfatase alcaline cu utilizarea de BCIP / NBT lichid substrat System ( «Sigma», SUA).

Rezultate. În condiții de cultură specifice MMSC au fost introduși pe o filiatie osteogenic, care a fost confirmată prin colorarea pozitivă a fosfatazei alcaline. preparare histologică amintește țesutului osos.

Concluzii. Aceasta tehnologie permite obtinerea unui transplant de-3D osteoprogenitive ex vivo.


Scopul studiului.

Pentru a proiecta un tridimensional in vitro osteoprogenitorny grefei.

Materiale și metode.

Ca purtători de linii celulare diferite, folosind probe de hidroxiapatita, sticlă ceramică, corticala demineralizata si matricea osului, biomaterial "osteomatrix" ( "Konektbiofarm", Rusia). Metoda de cultivare de celule a fost aplicată pentru izolarea și scara culturi de celule multipotente mezenchimale stromale (MMSC), periost și celule progenitoare (PKN). Înainte de celule coroborarea purtătorul a fost efectuat de bioosteoinduktsiyu ITCs dezvoltat și patentat de noi tehnologii. Pentru a îmbunătăți observarea vizuală localizarea celulelor de pe suprafața utilizată plasma skafoldov metoda de marcare cu membrană coloranților vitale RKN67 RKN26 Verde și Roșu Fluoreccent ( «Sigma», USA). Pentru detectarea fosfatazei alcaline a fost utilizată metoda citochimic folosind BCIP substrat / NBT lichid substrat System ( «Sigma», USA).

rezultate.

ITCs în anumite condiții de cultură induse de un mod osteogenic, care a fost confirmată prin colorare pozitivă pentru fosfataza alcalină. Histologic, medicamentul seamănă cu os.

constatări.

Aceasta tehnologie ofera o grefa 3D-osteoprogenitorny ex vivo.


¹Papadopoulos AG, ²Oksimets VM, ¹Oberemko AV, ²Magomedov YA
¹Institutul de Stat Instituția“de urgență și Chirurgie Reconstructiva. VK Gusak Științe Medicale din Ucraina "²Institutul de Cercetare de Traumatologie și Ortopedie de la Universitatea Națională Medical Donețk. M. Gorki, Donetsk, Ucraina