Metoda microbiologică pentru diagnosticul de laborator al bolilor infecțioase

După primirea rezultatelor de inspecție și luând în considerare datele epidemiologice stabilite diagnostic final. In diagnosticul indică formă nosologică cifru ICD-10, metoda de confirmare a diagnosticului, severitatea și evoluția bolii, stadiul bolii, prezența unor boli concomitente și complicații, cum ar fi „Typhoid (hemocultura), severitatea bolii, perioada razgara- complicație - intestinale krovotechenie- care însoțește boala - diabet ". Ca diagnostic precis și detaliat determină strategia terapeutică.

În unele cazuri, atunci când datele clinice sunt insuficiente, iar testele de laborator nu permit să se stabilească etiologia bolii, poate fi stadializarea diagnostic sindromal (de exemplu, intoxicație alimentară, bolile respiratorii acute, SARS).

Studiile de laborator joacă un rol important în diagnosticul bolilor infecțioase, numirea unui tratament cauzal, efectuarea monitorizării eficacității tratamentului. proces diagnostic specific de laborator Se bazează pe identificarea agentului patogen și răspunsul organismului uman în timpul procesului infecțios. Se compune din trei etape: colectarea de materiale, de transport și de cercetare în laborator. Prin efectuarea fiecare etapă a introducerii cerințelor specifice privind conformitatea, care determină eficiența diagnosticului clinic de laborator. Sarcina medicului alegerea corectă a metodei de cercetare și evaluare corectă a rezultatelor sale.

Metode de diagnostic de laborator diferă sensibilitate și specificitate. Sensibilitatea metodei reflectă probabilitatea ca rezultatul testului este pozitiv, pacientul infectat și este determinată de raportul dintre numărul total de rezultate pozitive la numărul total de pacienți infectați. Cu cât sensibilitatea, cu atât mai puțin probabilitatea de rezultate fals negative. Criteriul de specificitate reflectă probabilitatea ca rezultatul testului va fi pozitiv la pacienții neinfectați, și se calculează ca raportul dintre numărul total de rezultate negative la numărul total de pacienți neinfectate. Mai puțin specifice, cu atât mai mare probabilitatea de rezultate fals-pozitive. Ambele cifre sunt exprimate în procente.

Metoda de diagnosticare microbiologică bazată pe detectarea agenților patogeni din material biologic. Utilizați o microscopie optică și electronică lumină.

Metoda microbiologică utilizată pe scară largă în diagnosticul bolilor infecțioase ale bacteriene, etiologia protozoar și, rareori, a bolilor virale.

În practica de laborator bacteriologice examenul microscopic în cele mai multe cazuri, are o valoare indicativă diagnostic rapid. Sarcinile principale sunt detectie microscopie agentului patogen în probe clinice, identificarea aproximativă pe baza determinării semnelor caracteristice ale bacteriilor morfologice și tinctoriale și examinarea frotiurilor colorate ale culturilor pure din colonii.

Materialul pentru examenul microscopic poate fi sânge, măduva osoasă, lichidul cefalorahidian, ganglionii punctiformă limfatici, fecale, conținutul duodenal si bila, urina, sputa, secretii ale tractului urogenital, biopsii ale țesuturilor, frotiuri din mucoasa gurii, amigdale, nazală și altele.

Pentru detectarea „paraziți sânge“, de exemplu, protozoare (Plasmodium malarial, trypanosomes, Leishmania, Babesia) și helminții (microfilaria), medicamente testate „frotiu subțire“ și / sau „picătură gros“ de sânge.

De droguri „drop-gros“ preparate în două moduri:

Usuce „picătură gros“ ar trebui treptat în aer, fără încălzire, sub protecția acestora împotriva atacului insectelor. colorate cu produse din sânge fără fixare prealabilă cu Romanovsky-Giemsa.

să se pregătească frotiu subțire face amprenta de sânge lângă marginea diapozitiv, apoi un unghi de margine de 45 ° este alimentat în picătură și se taie sticla după răspândirea de sânge de-a lungul marginii sale o mișcare continuă să distribuie de sânge de-a lungul suprafeței diapozitiv. Preparatul obținut este fixat și colorate.

Fluidul spinal pentru examinarea microbiologică sunt luate într-un tub steril în timpul puncție lombară. Pentru a prepara formularea folosind un precipitat format spontan sau prin centrifugare.

Frotiuri din cavitatea membranei mucoase orale luate pe stomacul gol sau la 2 ore dupa masa un tampon de vată sterilă, frotiu neimprimată se prepară pe o lamelă de sticlă. În cazul în care stocul de film ultimul este îndepărtat cu ajutorul unei pensete sterile. Materialul din cavitatea nazală luate cu un tampon de vată sterilă, care este introdus adânc în cavitatea nazală. NP tampon luat zadneglotochnym tampon steril introducând-l ușor prin orificiul nazal în nazofaringe. Pentru analiza difterie explora atat pentru film cat si mucus de nas și gât. Materialul din nas si faringe ia diferite tampoane interne.

Urina a fost colectată pentru examinare microscopică într-un recipient steril după toaletă atentă a organelor genitale externe. Pentru a prepara formularea folosind sedimentul de urină.

examenul microscopic nativ supus (nefixate, necolorate) și preparatele colorate. În primul caz, dezvăluie microorganisme vii în produsul „agățat picătură“ sau „picătură zdrobit“ prin evaluarea motilității și a proprietăților morfologice ale inițiatorului. De exemplu, microscopie cu câmp întunecat al preparatelor native utilizate pentru diagnosticul spirochetosis (sifilis primar, leptospiroza, epidemic (vshinogo) febră recidivantă), candidoza sau alte boli fungice. În aceste cazuri, rezultatul examinării microscopice oferă motive pentru un diagnostic.

Cele mai utilizate pe scară largă microorganisme în stare colorate microscopie, în special pentru diagnosticul bolilor parazitare (malaria, amoebiaza, giardiaza, leishmanioza, helmintiază). Pentru agenții de colorare utilizați pentru referință, metode speciale și diferențierea. colorat aproximativă ne permite să se estimeze morfologia de ansamblu a microorganismului. În acest scop, utilizați coloranți standard - fucsin sau metilen albastru.

Dintre metodele specifice utilizate cel mai des colorația Gram. Această metodă relevă capacitatea bacteriilor de a reține violet colorant cristal (sau violet de gențiană) sau decolora în alcool. Bacteriile gram pozitive sunt colorate purpuriu și Gram - în roșu, deoarece decolora în alcool și se colorează în continuare magenta. agenți de colorat Gram vă permite să definiți o alegere primară a mijloacelor de terapie cu antibiotice.

Metodele speciale de vopsire includ Ziehl-Nielsen, care scoate în evidență și alcool-bielectrice bețișoare, în special Mycobacterium tuberculosis, care sunt colorate în roșu, iar microorganismele rămase - în albastru.

diferențierea apel metode colorarea elementelor individuale ale celulei bacteriene. De exemplu, metahromatinovyh colorant (volyutinovyh) incluziuni în bacterii (ca Neisseria, Mayer), capsule de colorat (Giessen Leyfsonu Anthony), spori, flageli (prin Leffler, Bailey, Gray și colab.), Cromatinei peretelui celular (nuclear) elemente (Romanowsky-Giemsa și Pekarsky).

Prin metode de investigare microscopice includ imunofluorescență (Microscopie fluorescentă) utilizate pentru diagnosticarea infecțiilor bacteriene și virale, precum și bazate pe utilizarea anticorpilor marcați cu un colorant fluorescent.

Eficacitatea metodei microscopice este determinată de sensibilitatea și specificitatea acesteia. Specificitatea limitată posibila identificare eronată a agentului din cauza artefacte. În plus, în timpul tehnicii examenul microscopic are valoarea de cercetare este, de exemplu, în diagnosticul de sânge malarie testează sensibilitatea metodei de „film gros“, de 20-40 de ori mai mare decât în ​​studiul prin frotiu subtire, deoarece acest medicament vă permite să vizualizați un volum mai mare de sânge, și, în plus, de Plasmodium în produsul sunt situate extracelulară pentru a facilita detectarea și cuantificarea acestora.

Cu toate acestea, sensibilitatea metodei de „film gros“, realizat de standardele OMS (studiul a cel puțin 100 de câmpuri vizuale pentru cel puțin 5 minute), dar nu depășește 95%, din cauza distribuției inegale a sângelui paraziti malarie, in special la niveluri scăzute de parazitemiei.

O modalitate importantă de a îmbunătăți sensibilitatea metodei este utilizarea metodelor microbiologice diferite concentrații de agenți patogeni, cum ar fi precipitarea sau flotație de probe de scaun în timpul studiului, și filtrarea printr-un filtru milipor probe de sânge, urină, lichid cefalorahidian.

Îmbunătățirea eficienței examinării microscopice a relevat facilitează cuantificarea parazitului în câmpul vizual sau unitate de volum a materialului. În special, malaria (în special atunci când detectarea R.Gakpragit) importante intensitate parazitemiei determinarea.

Cuantificarea microflorei în frotiu, și microbiene identificarea asociațiilor sunt importante în determinarea momentului necesar de rol etiologic microorganisme patogene condiționat. Este cunoscut faptul că concentrația maximă de bacterii detectabile în frotiu materialului nativ este de 10  celule în 1 ml. Pentru cea mai mare parte a materialului este considerat a fi de detectare a etiologically semnificative bacterii oportuniste tip particular într-o concentrație de cel puțin 10 -10  celule în 1 ml, astfel încât sensibilitatea metodei microscopice în cele mai multe cazuri satisface nevoile microbiologie clinica.

Yushchuk ND, Vengerov YY

Distribuiți pe rețelele sociale: