Inițierea diferențierii limfocitelor B. Schema de start a diferențierii în celule

Conținutul de cAMP și cGMP în celule este determinată în mare măsură de raportul dintre activitatea adenilat ciclazei și guaniltsiklazy (ele catalizează formarea de ATP și GTP), pe de o parte, și activitatea fosfodiesterazelor care catalizează dezintegrarea lor, - pe de altă parte. Hormonii, conectarea cu receptorii celulari de suprafață, aceste enzime sunt activate, fixate în membranele celulare. Acest lucru duce la o schimbare in celulele ca rapoarte și nivelele de cAMP și cGMP și schimbă cursul unei serii de procese biochimice intracelulare (Chandra e. A., 1974). Este tentant să presupunem că în acest fel antigene și mitogene, care unește receptorii de suprafață ai limfocitelor B, „lansarea“ ei într-un lanț de procese biochimice care conduc la diferențierea și proliferarea.

Studiul acestei probleme efectuat în mai multe direcții. Conform acestei scheme, antigenul reacționează cu receptorii de imunoglobulină membrană activează adenylcyclase crește sinteza cAMP și schimbările în favoarea sa raportul de cAMP / cGMP. Acest procese biochimice schimburi spre răspuns negativ. Spre deosebire de mitogeni de celule de semnal T antigen și care acționează pe membrana celulelor, și activate raportul de deplasare guaniltsiklazu AMPc / GMPc în favoarea cGMP. Aceasta direcționează procesele biochimice în direcția pozitivă a răspunsului imun asociat cu proliferarea și diferențierea celulelor respective.
Avantajul acestei scheme de următoarele date.

1. Adăugarea mitogeni ca celulele B (Watson, 1975a) și celulele T (Hadden e. A., 1972, 1976) determină o rapidă (15-30 min) și ascuțite (5-50), creșterea conținutului de cGMP, fără a schimba în mod semnificativ nivelurile de cAMP (De Rubertis e. a., 1974).

2. cea mai mare parte (Mai mult de 90%, potrivit Watson, 1975a) și gauniltsiklazy fixe limfocite adenylcyclase in membranele celulare. Mitogeni pot activa aceste enzime (Watson, 1975b- Smith e. A., 1971).

3. Raportul dintre cAMP / / cGMP în care proliferează lent culturi este semnificativ mai mare decât în ​​proliferante rapid. Astfel, este in celulele de șoareci splină atimici după stimularea cu lipopolizaharide mitogen a scăzut de la 9,2 la 3,1 (Watson, 1975b).

4. Adăugarea cGMP Celule splenice soareci athymic a determinat o creștere dramatică în sinteza ADN-ului. Eticheta timidina autoradiografie detectată după stimulare cu 10% din suspensia de celule de splină (în loc de 1%, în secțiunea de control).

contrast, efectul de AMPc sinteza ADN-ului a inhibat (Webb e. a., 1975- Watson, 1975b). Același efect exercitat de substanță (de exemplu, toxina holerei, prostaglandină, teofilina), crește endogen nivelul cAMP datorită activării adenilat ciclazei sau inhibarea cAMP-phos-fodiesterazy (De Rubertis, 1974).

În favoarea valorilor modificările conținutului AMPc pentru dezvoltarea anticorpului indicat prin experimente care au examinat schimbarea după imunizarea șoarecilor cu eritrocite de oaie. nivelurile de cAMP în celule de splină imediat (în 2 minute) după imunizare brusc (2 până la 3 ori mai mare) a crescut, dar apoi au scăzut pentru durata proliferării mai intensă KLA (Plescia e. A., 1975- Yammamoto, Webb, 1975). Acțiunea mitogene a creșterii celulelor T de cGMP sau cAMP a fost observată de mulți cercetători (de exemplu, Hadden e. A., 1976).

Ar trebui, totuși, să se constate că, după cum sa discutat schemă, și, în general, pentru a studia rolul 3` ciclic, 5`-monofosfatnukleotidov se confruntă cu multe provocări. În primul rând, o creștere a cGMP intracelular cauzează multe substanțe care nu au activitate mitogenică. În al doilea rând, în anumite condiții, adăugarea de cAMP stimulează dramatic sinteza ADN-ului (Mac Manus e. A., 1975). În al treilea rând, populația de celule limfatice getorogenna foarte periculoase pentru a lega modificările identificate în analiza populației totale, cu modificările din clona studiată KLA.

eterogenitate celule limfatice populație Se face foarte dificil de a studia și de a acționa asupra lor din afara AMPc sau compușii adăugat, ridicând nivelul intracelular. Unii cercetători au observat, astfel, suprimarea anticorp (Chandra e un, Watson modelul anului 1974, 1975a ..), și altele - stimularea (Ishizuka ea, 1970- Winchurch 1974 ..). Mai mult, acțiunea cAMP și cGMP poate fi inversat în funcție de concentrația lor (Webb e. A., 1973). Și, în sfârșit, există dovezi puternice că AMPc este implicată în reglarea ciclului celular nu este necesară. Acest lucru este indicat prin conservarea normale mutanți ciclului celular în limfom de șoarece S49 în ciuda lipsei dependente de AMPc protein kinazei. Adaugarea la aceste celule, chiar și o cantitate mare de cAMP nu este inhibat proliferarea lor (Coffino e. A., 1975). În ciuda tuturor acestor dificultăți, pentru a studia rolul ciclic 3`-, 5`-nucleotide în activarea celulelor B este foarte promițătoare.