Imunoterapie genetica si cancer

Prin urmare, un interes tot mai mare în noi metode de reperare (vizate) terapie.

Prin terapia genica realiza transferul de material genetic în scopuri terapeutice într-o celulă, țesut sau organ în cazul în care materialul începe să-și exprime un produs genetic particular.

în arta avansează tehnologia ADN-ului recombinat permite noi perspective asupra creșterii celulelor umane, mecanismele de reglementare sale și încălcarea acesteia în timpul procesului tumoral.

Pentru terapia genica de succes necesita urmatoarele:

• pentru a identifica și izola gena funcțională, care, după introducerea într-o celulă, țesut sau organ elimina tulburare genetica;
• să dezvolte o metodă de livrare a genei în celulă;
• să poată controla expresia genei introduse.

În ciuda faptului că lumea a făcut mai mult de 600 clinice

studii privind terapia genică, cele mai multe dintre ele reprezintă o faza I si II, studiile clinice. Nu există în prezent nici un oficial sancționat pentru aplicarea clinică a tehnicilor de terapie genică. În Regatul Unit, această problemă este gestionat de către Comitetul consultativ pentru terapia genică. Ca și în cazul altor tratamente noi, terapie genică în timp ce încerca să pacienții cu stadii avansate de cancer. Cu toate acestea, în viitor, aparent, rolul său este semnificativ mai ales în tratamentul cancerului într-un stadiu incipient, sau după îndepărtarea chirurgicală a tumorii (adică, acesta este aplicat ca tratament adjuvant).

În prezent, în conformitate cu metodele de dezvoltare în domeniul terapiei genice, în parte, de asemenea, utilizat în imunoterapia cancerului, care aduce aceste două tendințe într-un singur - cancer Immunogenetics.

Imunoterapia se bazează pe efectele asupra mecanismelor imunologice de dezvoltare a tumorilor maligne. Acest efect are ca scop atât creșterea imunității active, precum și crearea unui pasiv de către agenți biologici.

Imunoterapia poate fi de două tipuri:

• nespecifică;
• specifice - utilizarea unor medicamente care se leaga de antigene tumorale.

Ideea de a crea un vaccin împotriva cancerului nu este nou. Ea a apărut pentru prima dată în perioada în care a fost demonstrat rolul de infecție la începutul dezvoltării unor tumori:

• VLCH - cancerul de col uterin;
• VHB - carcinomul hepatocelular;
• VEB - limfom Burkitt și carcinomul nazofaringian.

Apoi, sa sugerat ca un vaccin impotriva antigenelor tumorale specifice par a fi tratate și de tumori, a căror natură infecțioasă nu este dovedită. Avantajul acestei metode de tratament ar fi posibil pentru a genera un răspuns imun specific la introducerea unor factori genetici care au fost supuse amplificării și difuzării ulterioare, acționând asupra celulelor tumorale in parti indepartate ale corpului. Cele mai multe „investigații moderne de terapie genica folosind metode imunogenetice.

Abordări la terapia genică a cancerului

Somatic corecție defect genetic:

• expresia genelor supresoare a creșterii tumorale;
• întrerupere expresie mugantnogo oncogen oligonucleotide antisens.

Activarea genetică a prodrogului.

imunomodulare genetice:

• imunoterapie nespecifică;
• imunoterapie specifică.

corecție defect genetic somatic

Expresia genelor supresoare a creșterii tumorale

gene supresoare cresterea tumorii in carcinogeneza isi pierd functia. Pierderea completă a funcției de suprimare deschidere promoveaza cresterea tumorii sau progresia tumorii are loc numai în inactivarea ambelor alele ale genei. De exemplu, gena p53 codifica o proteină nucleară care acționează ca un factor de transcriere, blocarea progresiei tumorii. Aproximativ 50% din celulele tumorale ale cancerului uman dezvaluie o proteina p53 mutante, și-a pierdut funcția. Mutațiile pot fi moștenite sau dobândite. gene K, gene supresoare tumorale includ, de asemenea RB1 (retinoblastom) și E-caderină.

Video: Noua cura de gene non-virale pentru cancer

Modelul tumorii experimente in vivo sub gene-inlocuire supresoare tumorale mutante copii normale ale genelor prin vectori virali duce la inhibarea creșterii tumorii și restaurarea fenotip normal. Cu toate acestea, transferul acestor constatări preliminare la clinică nu a dat rezultate încurajatoare. In faza I si II, studiile clinice la pacientii cu NSCLC cu introducerea genei p53 mutatie a unei tumori vector retroviral cu p53 de tip sălbatic nu a dat efectul. Există motive să credem că corectarea cu succes a genei p53 in asociere cu chimioterapie, cum ar fi cisplatina, mozhrt reduce expresia în celulele tumorale care linia.

întrerupere expresie mutaitmogo oncogenă oligonucleotide antisens

Proto-oncogenele - gene care sunt activate în procesul de carcinogeneză. Gene produs este o proteină (de exemplu, un factor de creștere sau factor de transcriere), care joacă un rol esențial în reglarea proliferării celulare. Pentru încălcări ale reglementării normale a diviziunii celulare, proto mutație suficient (ereditară sau dobândită) este doar un singur exemplar. oligonucleotide ADN antisens sunt secvențe scurte de nucleotide sintetice, care sunt complementare la secvențe specifice de ADN sau ARN, care sunt concepute pentru a separa oncogene. Utilizarea antisens oligonite-nucleotide - inhibarea transcripției sau translației ARNm ARNm proteină. Aceasta limitează expresia genelor și astfel formarea produsului genei.

Astfel, BCL-2 este o oncogena, care joaca un rol in dezvoltarea cancerului de prostata rezistente la terapia cu hormoni. Exprimarea genei bcl-2 contribuie la profesie tumorii. Supraexpresia celulelor Bcl-2 cauzeaza rezistenta la apoptoza. Aceasta gena este o țintă de moleculă antisens G3139. Medicamentul oblimersen (genasens), creat pe baza oligonucleotidă, este in curs de studii clinice la pacientii cu cancer de prostata in stadiu avansat. Un alt exemplu de încercări de trecere antisens oligonucleotidului servește ISIS 3521 (Affinitak), ținta - non-receptor tirozin kinazei. care densitate crește atunci când un număr de tumori solide, inclusiv NSCLC.

activarea genei prodrogurilor

Principalul dezavantaj al chimioterapiei moderne - lipsa de selectivitate a acțiunii. Pentru a crește selectivitatea prin metoda transferului de gene. Direcționarea în funcție include următorii pași.

• Gena codifică o enzimă care activeaza medicamentul, este încorporat în celulele tumorale.
• După aceea, administrate în mod regulat promedicament.
• Activarea enzimei transforma un promedicament într-un metabolit toxic
• celule tumorale moare ca urmare a următoarelor modificări: formarea locală metabolita- efectul citotoxic al așa-numitului „martor“ în care celula non-transgenice, în timp ce într-o populație mixtă de celule ucise în prezența prodrogului prin difuziune al acesteia din urmă, și care încorporează transport activ imun local poate răspundeți cu să asigure eficiența metodei, chiar și în absența unui transfer de gene extrem de eficiente.

Scopul metodei de transfer de gene, - numărul maxim distruge celulele tumorale in timp ce minimizarea toxicitatii sistemice.

Metoda este cunoscută sub diferite denumiri:

• promedicament terapia genică activare (GPAT - terapie de activare prodrog genetică);
• reglare a genei sistemului enzimatic promedicamentului (GDEPT - dirijate la gena sistem de promedicament enzimatic);
• terapia bazată pe reglarea promedicament enzimatic prin vectori virali (VDEPT- terapia direcționată virus enzima promedicament), transferul de gene prin intermediul vectorilor virali;
• terapia genica sinucidere.

Principalele dezavantaje ale metodei de activare a genei prodrogurilor sunt:

• transferul de gene insuficient de eficiente in celulele tumorale asociate cu imperfecțiunea vectorilor existenți;
• nevoia de injectare directă intratumorală de gene, în care efectul nu este comun, ci doar o umflătură foarte limitată.

Video: Gordon №172 imunoterapia cancerului

In prezent, studiile sunt concepute pentru a răspunde la întrebarea dacă activarea ennaya precursorilor care urmează să fie mutat din domeniul teoriei în practică, nu sunt încă finalizate. Un prototip de sistem enzimatic promedicament gena activabil este nitroreductaza bacteriana. Acesta convertește un SV1954 promedicament (acesta poate fi administrat intravenos sau intraperitoneal fara teama de complicatii) in foarte toxic agent de alchilare nitrobenzamidin. gena nitroreductazei ar putea fi introduse în tumoare prin injectare directă. Administrarea sistemică ulterioară a SV1954 promedicament ar duce să-l dezguste în citotoxic nitrobenzamidin doar dacă se introduce gena in genomul celular. Eficacitatea terapeutică a acestei metode nu a fost încă dovedită, dar studiile la pacienții cu cancer la ficat este in prezent in curs de desfasurare.

imunomodulare gena

Non-imunoterapia

Scopul imunoterapie nespecifica - creșterea răspunsului imun în general, dar nu declanșează un răspuns imun împotriva unui anumit antigen. Pacientul a fost imunizat substanțe care provoacă un răspuns imun care ar putea opri sau cresterea tumorii lenta. Studiile anterioare au fost efectuate cu BCG și citokine, cum ar fi interferon alfa și interleukina 2.

imunoterapie specifică

Dezvoltarea unor numeroase metode de inducere a unui răspuns imun la antigene specifice tumorale.

Antigenele țintă ar trebui să aibă următoarele proprietăți:

• exprimate numai în celulele tumorale, și numai în cantități foarte mici în alte țesuturi;
• exprimate ca celulele tumorii primare și celulele sale metastaze;
• sau recunoscute de către sistemul imunitar pe suprafața celulei, sau sub formă de fragmente, proteine ​​ale complexului major de histocompatibilitate (MHC) aferente.

Următoarele secțiuni evidențiază în prezent în metode de dezvoltare inducerea antitumorale răspunsurilor imune specifice.

Preparate de celule tumorale intregi

vaccin individual pentru fiecare pacient generat pe baza de material obținut din propria tumoră, și sunt administrate, de obicei, cu un adjuvant de preparare, cum ar fi BCG.

Nu este nevoie de a identifica antigene tumorale specifice.

Posibilitatea de a obține vysokoimmunogennyh vaccinuri pentru utilizarea clinică este limitată.

rezultatele încurajatoare ale unui vaccin tumoral pe un grup mic de pacienți care au avut o interventie chirurgicala pentru cancerul de colon. Vaccinul crește ușor durata perioadei fără recidivă.

vaccinurile peptidice

Daca izola și identifica un antigen tumoral, peptidele derivate din antigen, poate fi folosit ca elitopov pentru imunoterapie. Pentru a stimula sistemul imunitar poate fi utilizat de asemenea epitopi sintetici. Până în prezent testat în intradermice clinică sau injectare subcutanată, de obicei, în combinație cu un adjuvant imunologic BCG. crește în continuare posibilitatea administrării recunoașterii antigenului prin intermediul supravegherii imunologice tumorale și, prin urmare, respingerea acesteia. Un exemplu de peptidă antigen tumoral specific, sunt în prezent în studiu, este mucina. Este o greutate moleculară mare glicoproteina exprimate pe celulele mucoasei gastro-intestinale. Într-o serie de tumori maligne, inclusiv cancer pancreatic și cancer de colon, spun supraexprimarea. Nu este încă suficiente dovezi pentru a susține o corelație între răspunsul imun și un beneficiu clinic.

vaccinuri ADN

In loc de a folosi ca proteină antigen tumoral poate fi selectată ca gena țintă, supraexprimat la pacientii supusi tumorii. Acest lucru presupune crearea unui vaccin ADN recombinant, în care vectorul este utilizat pentru a transfera ADN-ul care codifică o proteină tumorală. Prezentarea proteinei antigenice induce o imunitate umorală și celulară. Ca obiective pentru vaccinurile ADN sunt selectate următoarele substraturi.

• Gena mutantă este o tumoare supresoare 053. prezența a mai mult de 50% dintre pacienții cu cancer.
• antigenul carcinoembrionar - glicoproteina membranei celulare și supraexprimarea acesteia a fost observat la majoritatea pacienților cu cancer colorectal. În mod normal, niveluri scăzute de exprimare a acestui antigen în celulele nota de colon, și mucoasa tractului biliar. Gene. care codifică antigenul carcinoembrionar este inserat în vectori diferiți pentru utilizare ca vaccinuri. Deși numeroase studii clinice în fazele I și II a confirmat tolerabilitatea vaccinurilor ADN împotriva antigenului carcinoembrionar, dovada eficacității sale clinice nu este
• MAGE-1 - produs genetic fetale asociate cu cancer de san si melanomul.
• Protein Her-2 / neu - receptor EGF, un domeniu intracelular care posedă activitate de tirozin kinază.

Dezavantajul vaccinurilor ADN - un număr limitat de antigene specifice tumorale. Cele mai multe dintre antigenele țintă nu sunt strict specifice tumorii și sunt exprimate, chiar dacă în cantități mai mici, de celulele normale. vaccinuri impotriva cancerului încă mai trebuie să treacă prin studii clinice.

Vaccinarea cu celule dendritice

Efecte asupra sistemului imunitar pentru a-tinta selectiv tesutul anti-tumoral, este asociat cu multe dificultăți. Este extrem de important de a alege un antigen adecvat. Cu toate acestea, succesul depinde și de prezentarea optimă a acestor antigene la sistemul imunitar. Necesitatea de a asigura o reprezentare eficientă a condus la introducerea celulelor dendritice cu antigeni. Celulele dendritice au o capacitate pronunțată de prelucrare a antigenului și prezentarea necesară pentru dezvoltarea HLA primare restricționate imunitatea celulelor T, atât de important pentru infecții, boli autoimune și tumori maligne. Aceste celule exprimă un număr mare de molecule HLA si alte molecule cu membrana. Descoperirile recente în tehnologie au permis de cercetare pentru a cultiva in celulele dendritice in vitro din precursori derivate din sânge și din măduva osoasă folosind ditokinov. Puteți introduce un antigen exogen în celulele dendritice cultivate, cum ar fi proteina tumorală, peptidă sau ARN) sau o genă care codifică un antigen tumoral (prin metode de transfer fizic, sau vectori virali). Se speră că prin administrarea simultană a antigenului de către celulele dendritice spori la maximum de răspuns ulterior de celule T, îmbunătățind astfel recunoașterea peptidei tumorale. Cu toate acestea, celulele dendritice sunt dificil de cultura, iar studiile clinice efectuate până în prezent, puțin, iar asul ei sunt doar într-un stadiu incipient.

Video: 172 imunoterapia cancerului

gena de livrare

Pentru succesul de sisteme de eliberare de terapie genica sunt necesare, prin care în mod fals eficient de transfer de gene, fără deteriorarea celulelor. Metode de număr livrare gene.

Metode fizice:

• Injectarea ADN-ului în mușchiul scheletic, utilizând o seringă convențională și ac;
• transfer de ADN prin lipozomi;
• transfecția balistică folosind microparticule de aur acoperite cu ADN-ul plasmidic ( „tun de gene“).

Beneficiile metodei fizice - confort și siguranță. Dezavantajele includ eficiența scăzută a transferului de gene și natura tranzitorie a expresiei sale.

Metode biologice, cum ar fi transferul folosind:

• Vectori bacterieni;
• vectori virali.

Avantajul utilizării vectorilor biologici, care este cea mai stabilă și eficientă metodă pentru a asigura inserția ADN-ului într-un număr semnificativ de țintă kpetok. Dezavantajele acestei metode includ complexitatea procedurii și posibilitatea formării în anticorpii gazdă de neutralizare.

Administrarea sistemică a genelor preveni următorii factori:

• De înaltă frecvență de reacție încrucișată imune cu anticorpi;
• vectori înalt imunogene.

Video: NyuVak. Tehnologia imunoterapia cancerului

Prin urmare, transferul de gene este realizată printr-o injecție locală metodă biologică.

Selecția vectorului pentru transferul ADN-ului depinde de scopul tratamentului:

• pentru înlocuirea genei este de dorit să se utilizeze vectori virali înalte;
• pentru un efect scurt necesar pentru a induce un răspuns imun sau celule sensibilizator la radioterapie, pot fi utilizate lipozomi.

Livrarea poate fi de următoarele tipuri:

• ex vivo - transferul genei terapeutice in celulele tumorale sau canceroase izolate, care sunt apoi reimplanted în organismul gazdă;
• in vivo - livrarea de gene la celulele țintă, pe baza diferențelor în transcrierea genelor specifice între tumoare și kletkami- normală această metodă pentru transferul de gene este mai puțin eficientă.