Sinteza imunoglobulina grele și lanțuri ușoare. Sinteza uniformă a lanțurilor grele și ușoare de anticorpi

Un studiu special al acestor probleme a fost efectuat experimente pe celule ganglionilor limfatici iepurilor imunizați (Fleischman, 1967) și celulele de mielom de șoarece (Knopf e. A., 1967), tag-ul de aminoacizi marcați cu puls. După diferite perioade de incubare a celulelor cu 3H-leucina sunt lanț H izolat, a fost digerat în fragmente (în cazul cianogen imunoglobulina bromură-iepure cu papaină sau în cazul imunoglobulina mielom) și radioactivitatea a fost determinată de raportul dintre aceste fragmente.

Sa demonstrat că raportul dintre radioactivitate fragment NH2-terminal (Fd) și fragmentul COOH-terminal (Fc), este relativ scăzută la 1-2 marca minut, crește până la 80% la 8 minute. Rezultate similare au fost obținute atunci când se compară activitatea NH2- și peptidele COOH-terminale ale lanțurilor de iepure H. Distribuția observată a etichetei pulsului în molecula sinteza lanțului H corespunde ipotezei unuia dintre punctul său de plecare.

În acest caz, în primul rând ar trebui să fie etichetate porțiuni de circuit dostraivalos, t. e. Peptidele COOH kontsa- treptat radioactivitate NH2- și peptidele COOH-terminale să fie aliniate, așa cum a fost gasit in experimente.

Date de sprijin ipoteza sinteza fiecărui lanț în ansamblu au fost obținute în studii metode similare de sinteză a H- și L-lanțuri în sistem liber de celule (Vassalli e. a., 1971). [Trebuie remarcat faptul că această concluzie nu este sigur. Astfel, distribuția neuniformă observată a etichetei poate fi explicată presupunând că celula are o piscină mică de V Regiunea-COOH terminal care leagă rapid la NH2 capetele conectate la regiunea poliribozomilor C.

O astfel de posibilitate este, în special, Acesta a curs din experimente Schubert și Cohnși care se găsește în celulele de mielom înjumătățește sinteza L-lanțuri (Schubert, Cohn, 1970). Cu toate acestea, datele privind ușurința extraordinară a hidrolizei L catenei sub influența enzimelor proteolitice (Solomon, McLaughlin, 1969) și chiar și în prezența acizilor slabi (Fraser e. A., 1972) sugerează că observate L-lanțuri destul de dezintegrare în aceste experimente decât sinteza a celor două jumătăți].

În ultimii ani, producția inițierea sintezei de H- și L-lanțuri de la un punct confirmat de o serie de date indirecte. Acestea includ detectarea sângelui la pacienții de urină și de mielom cu „defecte“ lanțuri H păstrând doar 17-18 HN2-terminal, dar peste 200 de aminoacizi COOH-terminal (Frangione, 1976). Astfel, în aceste circuite 100 de resturi lipsesc regiunea VH de 100 de resturi și S-zona. Este incredibil că ambele deleții a avut loc înainte de a combina și C-V gene care codifică lanțul-H, în fiecare dintre ele independent.
Prin urmare, prezența unor astfel de "defect„H Catenele confirmă ipoteza sintezei lor ca întreg dintr-un punct de plecare.

Argumentul următor este detectarea metionină de inițiere numai la NH2-terminal al precursorilor L-lanțuri (Schechter, Burstein, 1976) și în absența reziduurilor de metionil 107-109 pozițiile L-lanțuri (Wu, Kabat, 1970).

În cele din urmă, datele pot duce la confirmarea acestui punct de vedere, privind mărimea ARNm, care codifică sinteza H- și L-lanțuri derivate din ultimii ani, prezența unor astfel de ARNm în nucleotide care corespund secvențelor de aminoacizi ca V și C-regiuni ale H- și L-lanțurile, și posibilitatea de izolare a ARNm care codifică L-lanț din anticorpul poliribozomilor precipitat în mod specific atât VY, și la C-domenii (Schechter, 1974b).