Drept medical: drept, documente, responsabilități, reguli, acte.

Moscova, Centrul Federal pentru Inspecția sanitară Ministerul Sănătății din Rusia, 1999UtverzhdayuGlavny gosudarstvennyysanitarny vrachRossiyskoy FederatsiiG.G.ONISchENKO23 octombrie 1999 godaData introducere în ianuarie 2000 goda4.1 -1. METODE DE CONTROL. CHIMICA FAKTORYOPREDELENIE MASS KONTSENTRATSIIMIKOTOKSINOV în materii prime alimentare și PRODUKTAHPITANIYA. PREGĂTIREA PROBEI METODOMTVERDOFAZNOY EKSTRAKTSIIMETODICHESKIE UKAZANIYAMUK 4.1.787-991. Dezvoltat de către Centrul Federal Sanitară de Stat și epidemiologică MinzdravaRossii (VB Skachkov, IV Bragin, Regina NV) și CJSC"BioKhimMak CT" (Cercetator principal Vasiyarov GG, GS angajat starshiynauchny Alexeev, cercetător principal OsokinD.M., Doctor în științe chimice Staroverov SM.). 2. Aprobat și pus în aplicare șef gosudarstvennymsanitarnym doctor al Federației Ruse din 23 octombrie 1999 D.3. Vpervye.1 introdus. Scopul și domeniul de aplicare mostre primeneniyaNastoyaschie Metodicheskieukazaniyaustanavlivayutsposobypodgotovki de materii prime alimentare și produktovmetodom alimentară fază solidă de extracție posleduyuschegohromatograficheskogo pentru studii de analiză și securitate micotoxine sunt dlyaprovedeniyalaboratornyh instituții pischevoyproduktsii gossanepidsluzhby din Federația Rusă, precum dlyapredpriyaty și instituțiile implicate în materii prime de control al calității iissledovaniya alimentare și produse alimentare pentru consistență cu SanPiN 2.3.2.560-96 "Cerințe de igienă Kkachestvu și siguranța materiilor prime alimentare și pischevyhproduktov" și acreditat în conformitate cu poryadke.2 stabilite. Metoda de preparare a probelor de probPodgotovka cuprinde următoarele secțiuni: - obiect de testare extracție furnizează extract poluchenieedinogo conținând toate micotoxinele normalizat obiect vdannom de SanPiN 2.3.2.560-96-- extract de preparare a probei prin vklyuchayuschayapredvaritelnuyuochistku extracție fază solidă, purificarea kontsentrirovanieiokonchatelnuyu pe concentrarea cartușelor Diapak.3 . Cerințe bezopasnostiPri reactivilor solvenții și veschestvamineobhodimo sunt conforme cu cerințele de siguranță stabilite dlyaraboty substanțe toxice, corozive și inflamabile Pogost 12.1.005-88.4. Condițiile de preparare probProtsessy care efectuează prepararea și procesarea probelor soluție transportate condiții vnormalnyh la o temperatură ambiantă de 18 - 22grad. C.5. Aflatoxinei B1 (AP-B1), zearalenona (ZON), deoxinivalenolul (DON) și T-2 toxină (T-2) 5.1. Echipamente, materiale, reaktivyTablitsa 1 + ------------------------------------ + ------ --- + --------- + --- + --- + | Echipamente, materiale, reactivi | AT-B1 | ZON | DON | 2 || T și soluții + ---- + ---- + ---- + ---- + | ||| 1 | 2 | 1 | 2 | | ||| var |. Var |. Var |. Var. | | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | tip de probe, agitator | + || AVU-6C TU 64-1-2451-78 sau magnetice | || agitator mecanic sau -magnetic | | + ------------------------------------ + ----------- + ---------------- | balanță analitică cu o precizie de | + || cântărit 0,01 g +/- | | + ------------------------------------ + ----------- + ---------------- | tipul Mill "ciclon" QC-114 | + | + ------------------------------------ + ---------- ----------------- + | evaporator rotativ (TS-1m2, | + || W sau 25-1173.102-84 al.) | | + ------------------------------------ + ----------- + ---------------- | dispozitiv A pentru vacuum | + || aproximativ -0.7 mmHg (Waterjet | || pompă, ulei pompă cu vid | || hotei Medical) | | + ------------------------------------ + ----------- + ---------------- | dispozitiv cu vacuum pentru formare | + || probe (colectoare de vid), cu receptoare | || capacitate de porecle de încercare de cel puțin | || 10 cu. vezi | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | dispozitiv pentru evaporarea probe | + | + | - | - | - | - || curent de azot sub încălzire în jurul ||||| | || 40 de grade. C (aer uscat este de dorit ||||| | || Baie) ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | cartuș Concentrându Diapak A-3, | + | + | + | + | + | + || TU 4215-002-05451931-94, ||||| | companie || "BioKhimMak CT" ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | cartuș Concentrându Diapak AU-3, | - | - | - | - | + | + || TU 4215-002-05451931-94, ||||| | companie || "BioKhimMak CT" ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | Concentrându cartuș Diapak P-3, | + | + | + | + | - | - || TU 4215-002-05451931-94, ||||| | companie || "BioKhimMak CT" ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | cartuș Concentrându Diapak H, | + | - | + | - | + | + || TU 4215-002-05451931-94, ZAO ||||| | ||"BioKhimMak CT" ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | cartuș Concentrându Diapak C, | - | + | - | + | - | - || TU 4215-002-05451931-94, ||||| | companie || "BioKhimMak CT" ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | Pensetă medicală, 15 cm | + | + ------------------------------------ + ---------- ----------------- + | spatulă de metal sau porțelan | + || lingură | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | baloane cu fund plat conic | + | + | + | + | - | - || dopuri cu o capacitate de 50 de metri cubi. cm ||||| | || GOST 25336 ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | fundul plat-flacoane conice | + || (Erlenmeyer) vmestimos- congestie | || Tew 250 sau 300 cc. cm | || GOST 25336 | | + ------------------------------------ + ----------- + ---------------- | balon Buchner, cu o capacitate de 500 de metri cubi. | + || A se vedea | | + ------------------------------------ + ----------- + ---------------- | Pâlnie capacitate Bunsen | + || 200 cu. vezi | | + ------------------------------------ + ----------- + ---------------- | Capacitatea Pâlnie de separare | + || 250 cu. vezi GOST 25336 | | + ------------------------------------ + ----------- + | flacoane ---------------- ostrodonnye cu dopuri de pe | + || GOST 25336 cu konu- interschimbabile | || Somnul 14/23 capacitate de 5, 10 | || 25 cu. vezi | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | baloane în formă de pară, cu dopuri de pe | + | + | + | + | - | - || GOST 25336 cu interschimbabil konu- ||||| | || Somnul 14/23 capacitate de 10 si 25 de metri cubi. ||||| | || vezi ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | cilindrii de măsurare, cu o capacitate de 25, 50, | + || 100 cu. Celulele cm 2, în conformitate cu GOST 1770 | | + ------------------------------------ + ----------- + ---------------- | microseringă cu o capacitate de 100 de metri cubi. mm | + || (sau pipetă gradat GOST | || 20292 executarea de 4 sau 5, 1 Clasificare |. || sa capacitate de precizie de 1 cc) | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | hârtie de filtru (dens, îngust || - || - | + | + || koporistaya filtrare lent ||||| | | | tipul de sedimente subțire "albastru ||||| | || alimentare") ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | nesterilizat bumbac medicale, | + || x / b | | + ------------------------------------ + ----------- + ---------------- | acetonitril pentru cromatografie în fază lichidă | + || grafie, OP-3 OFS TU | || 6-09-14-2167-84, rectificat | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | Acetona, puritate ridicată, în conformitate cu TU 6-09-3513-75 | - | + | - | - | - | - || OP-2, rectificat ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | benzen, grad reactiv, în conformitate cu GOST 5955-75, vyder- | + | + | + | + | - | - || zhanny peste Na SO, rectificat ||||| | || 02 aprilie ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | heptan, hexan, XQ, TU | + | + | + | + | - | - || 6-09-3375-78 sau eter de petrol ||||| | || (fracția 70-100), grad reactiv, ||||| | Rectificată || ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | 2-propanol (alcool izopropilic), | - | - | - | - | + | + || xq, TU 6-09-402-75, ||||| | Rectificată || ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | Acid acetic glacial, xv, în | + | + | + | + | - | - || GOST 61-75 ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | cloroform, medicale, susținută | - | - | - | - | + | + || peste CaCl, rectificat ||||| | || 2 ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | clorură de metilen (diclormetan), | + | + | - | - | - | - || sustinut peste CaCl, ||||| | || 2 ||||| | Rectificată || ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | dietil eter, susținută peste | - | + | - | - | - | - || NaOH, rectificat ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | acetat de etil (acetat de etil || + || - || - || Acid), grad reactiv, în conformitate cu GOST 22300-76, || ||| | || susținută pe Na CO și rektifitsi- ||||| | || 03 februarie ||||| | Rowan || ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | sulfat de sodiu, grad anhidru, reactiv, a | + | + | + | + | - | - || GOST 4166-76 ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | clorură de sodiu, grad reactiv, în conformitate cu GOST 4233-77 | + | + ------------------------------------ + ---------- ----------------- + | apă distilată | + | + ------------------------------------ + ---------- ----------------- + | extractant - 84% acetonitril în vO | + || de, 840 de metri cubi. A se vedea acetonitril dovo- | || dyatsya la 1 litru de apă sau polucha- | || etsya prin distilare cu soluție apoasă de apă | || dar - amestec acetonitril (1: 4) | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | 33% benzen în acetonitril - se amestecă | + | + | + | + | - | - || 30 cu. A se vedea, benzen și 60 de metri cubi. A se vedea, acetonă ||||| | || tonitrila (1: 2) ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | 20% acetonitril în benzen - 20 cu |. + | - | - | - | - | - || cm acetonitril se diluează benzen ||||| | || până la 100 de metri cubi. vezi ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | 2% acid acetic în benzen - 2 | - | - | + | - | - | - || cu. vezi acid acetic diluat ||||| | || benzen până la 100 metri cubi. vezi ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | 5% acid acetic în benzen - 5 | - | + | - | - | - | - || cu. vezi acid acetic diluat ||||| | || benzen până la 100 metri cubi. vezi ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | 10% acetat de etil în benzen - 10 cu. | - | + | - | + | - | - acetat || cm diluat cu benzen la ||||| | || 100 cu. vezi ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | 25% hexan în aer - 25 cu. vezi | - | + | - | - | - | - || hexan diluat cu dietil eter ||||| | || până la 100 de metri cubi. vezi ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | 10% acetonă în diclormetan - 10 cu. | - | + | - | - | - | - || cm acetonă diluată cu diclormetan ||||| | || până la 100 de metri cubi. vezi ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | 20% acetonă în diclormetan - 20 cu |. - | - | - | - | + | - || cm acetonă diluată cu diclormetan ||||| | || până la 100 de metri cubi. vezi ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + 5.2. Metoda de preparare a micotoxinelor probOpredelyaemye recuperate extractant din proba proba de masa prisootnoshenii - volum de extractant de 1: 5. Când opredeleniiaflatoksina B1 și zearalenonă este extractul apos purificat pe mandrina -atsetonitrilnogo Diapak A-3 pe cartuș kontsentriruyutmikotoksiny Diapak P-3, se usucă prin evaporarea apei reziduale și redizolvarea iposle transportate ochistkuna finală mandrină Diapak H (Diapak C - în cazul porumbului și a produselor iznee ). eluare Fractional Două fracțiuni se obțin, soderzhaschieaflatoksin B1 și zearalenonă, gata pentru determinarea cromatografică a deoxynivalenol analizu.Pri și T-2 toxina provodyatpredvaritelnuyu apă de curățare - extract acetonitril napatrone Diapak AU-3 și concentrată prin evaporare la sec. Purificarea finală Poslepererastvoreniya se efectuează pe DiapakN cartușului. eluție fracționată se obțin două fracțiuni, soderzhaschiedezoksinivalenol și T-2 toxină, gata să hromatograficheskomuanalizu.Dlya gradul de validare a preparatului probei iutochneniya extracție micotoxine analiza aditivi standard de probymetodom la extractul original. de preparare a probei Osnovnyeharakteristiki de ekstraktsiiprivedeny solid în tabelul. 2. Tabelul 2OSNOVNYE preparare CARACTERISTICI probei + + --------------- + ---------------- --------- - + + ------------------- | Micotoxinelor | Ora | Gradul | relativă ||| probopod- | extracție, | medie kvadratiche- ||| gătit min. | % | Deviație Skoe,% | + + --------------- + ---------------- --------- - + + ------------------- | aflatoxină B1 | 120 | 75 | 20 | + + --------------- + ---------------- + ----------- - ----------------- + | Deoxinivalenol | 120 | 70 | 20 | + + --------------- + ---------------- + ----------- - ----------------- + | Deoxinivalenol | 90 | 85 | 10 | + + --------------- + ---------------- + ----------- - ----------------- + | T-2 toxină | 90 | 85 | 10 | + + --------------- + ---------------- + ----------- - ----------------- + pentru a atinge gradul necesar de extracție tochnovypolnyat cerințelor de calificare pentru solvenți organici și ihpodgotovke prepararea soluțiilor enumerate în Sec. 5.1.Algoritm căutare pentru posibilele pierderi de țintă probelor micotoxine pripodgotovke este prezentat în apendicele 1 la prezenta Metodicheskimukazaniyam.5.3. Prepararea de concentrare patronovPatrony Diapak sunt coloană de plastic conținând 1 sau 3 metri cubi. cm sorbenta.5.3.1 ermetic ambalate. Un cartuș de stivuire Diapak-3Vskryt cartuș ieșire linie Diapak A-3, eliminarea polimernuyuzaglushku. Set cartuș vertical kontsomvniz îngust un dispozitiv adecvat de colectare și evacuare elyuata.Ostorozhno deschide capacului cartușului de polimer pentru a forma un strat superior de rovnyygorizontalny sorbent atingând popatronu și fixați-l folosind un mic bumbac tampona.Podklyuchit aspiratoarele pentru evacuarea vidului și a unui cartuș obespechitpodachu cartuș .Kontsentriruyuschy Diapak A-3 nu iregeneratsii de unică podlezhit.5.3.2. cartuș Concentrându Diapak AU-3Podgotovka cartuș de concentrare Diapak AU-3 provoditsyaanalogichno n. 5.3.1.Kontsentriruyuschy cartuș Diapak AU-3 iregeneratsii de unică folosință nu podlezhit.5.3.3. cartuș Concentrându cartuș Diapak P-3Setați Diapak P-3 într-un podhodyascheeustroystvo vertical pentru vid și deschide partea de sus adsorbantul kryshku.Suspendirovat timp ce se amestecă cu o baghetă de sticlă în 10kub. A se vedea benzen, se lasa sa stea adsorbant și dor la slabomvakuume, evitând pătrunderea aerului în posledovatelnopo sorbentului 10 cu. cm de benzen și acetonă strat atsetona.Sohraniv de aproximativ 2 cm, pentru a introduce polimernyyfiltr poros (disponibil în kit) și sigilați-baghetă verhnemusloyusorbenta.Zatempropustit rămasă acetonă și secvențial cu 10 cc. cm extractant și amestecul -apă extractantului (1: 1), împiedicând pătrunderea aerului la adsorbantului cu skorostyu2 - 3 picături sekundu.Sohraniv eluant strat durează aproximativ 2 cm, dezactivați vid mufla primul capac cartuș superior și apoi (posleprekrascheniya picură) și clapa de jos. Astfel cartuș boala preparate pot fi stocate în timpul zilei de lucru, și se usucă prisluchaynom este în stare de lucru prokachivaniem10 cub. cm amestec extractant - apă (1: 1) cartuș .Kontsentriruyuschy Diapak P-3 reutilizabile Schema ipodlezhit regenerare, așa cum este descris mai sus, după provedeniyaprobopodgotovki.5.3.4. Concentrându Diapak NSnyat mandrină cu mandrina Diapak H dopuri să treacă prin ea cu ajutorul seringii 5 cc. vezi benzen și se sigilează ambele capete, astfel cartuș patrona.Podgotovlenny poate fi stocat în techeniesutok la o temperatură nu mai mare de 25 de grade. cartuș C.Kontsentriruyuschy Diapak H ipodlezhit reutilizabile de regenerare în urma scheme după provedeniyaprobopodgotovki: - după prepararea DT probă - sări secvențial cherezpatron 5 cu. cm de etanol, acetonă și după prepararea probei benzola-- AZ - sări secvențial cherezpatron 5 cu. cm acetonă și benzola.5.3.5. Concentrându cartuș Diapak SSnyat cu cartușul C Diapak dopuri să treacă prin ea cu ajutorul seringii 5 cc. vezi benzen și se sigilează ambele capete, astfel cartuș patrona.Podgotovlenny poate fi stocat în techeniesutok la o temperatură nu mai mare de 25 de grade. nu iregeneratsii de unică folosință cartuș C.Kontsentriruyuschy Diapak C podlezhit.5.4. mikotoksinov5.4.1 de extracție. Cereale și zernoprodukty25 g probă măcinată transferat într-un balon conic și cub zalit125. A se vedea extractant. Se efectuează balon intensiv peremeshivaniesoderzhimogo timp de 30 min. Extract filtru cherezbumazhny "albastru panglică".5.4.2. Nuci și semințe oleaginoase kultur25 g eșantion transferat într-un flacon Erlenmeyer dobavit125 cub măcinat. A se vedea extractant și 40 de metri cubi. vezi hexan. Perform conținut balon intensivnoeperemeshivanie timp de 30 minute. Posleperemeshivaniya se adaugă pentru a extrage 1 g de clorură de sodiu și prodolzhitperemeshivanie timp de 5 min. Se filtrează printr-o hârtie de filtru"albastru panglică". Extractul filtrat a fost transferat la soluție și după mănunchi delitelnuyuvoronku colectează -atsetonitrilny stratul apos inferior. Extractul acetonitril degresa 25 cc de hexan într-o pâlnie de separare, cu o capacitate de 250 metri cubi. sm.Ekstrakt transferat într-o pâlnie de separare, se adaugă 25 cc de heptan și se agită energic. După separarea sobratnizhny apă - ekstrakt.5.4.3 acetonitril. Ulei rastitelnoe25 g de ulei transferat într-un balon Erlenmeyer, se adaugă 40 cc. smgeksana și 125 de metri cubi. A se vedea extractant. Perform conținut balon intensivnoeperemeshivanie timp de 30 minute. Posleperemeshivaniya pentru a face extract 0,2 g NaCl iprodolzhit agitare pentru 3 - 5 minute. Extractul a fost transferat vdelitelnuyu pâlnie și după separare în straturi colecta strat inferior de apă și acetonitril. Extractul acetonitril degresa 25kub. vezi hexan sau heptan sau petrol capacitate delitelnoyvoronke eter de 250 cu. sm.Ekstrakt transferat într-o pâlnie de separare, se adaugă 25 cc de heptan și se agită energic. După separarea sobratnizhny apă - ekstrakt.5.5 acetonitril. Purificare și prob5.5.1 concentrare. Purificarea și concentrarea probei la opredeleniiaflatoksina B1 și zearalenona5.5.1.1. purificare preliminară și cub de concentrare proby25. Extractul degresată cm a trecut prin patronDiapak A-3 la o viteză de 2 - 3 picături pe secundă și 20 cc selectați elyuata.Poluchenny volum eluați de 20 metri cubi. vezi dilua obemomvody egal. Soluția rezultată a fost trecută printr-un cartuș Diapak soskorostyu P-3 1 - 2 picături pe secundă, apoi cartușul a fost spălat cu 5 cc de apă și purjate cu aer pentru 1 min.Tselevuyu fraktsiyuelyuirovatspatronaDiapakP 3posledovatelno 7-cub. acetonitril și 7 cm cub. 33 cm protsentnogobenzola acetonitril - la o viteză de 1 - 2 picaturi sekundu.Sobranny eluați a fost trecut printr-un pat de sulfat de sodiu anhidru (10 g), prin gravitație. Balonul a fost clătit cu 2 cc. 33 cm protsentnogobenzola în acetonitril, iar conținuturile transferate aceluiași sulfat de sodiu sloybezvodnogo. Se spală sulfatul de sodiu 3 cu. sm33 procente benzen în acetonitril. Uscat Filtratul uparitdosuha pe un evaporator rotativ la o temperatură nu mai mare de 40 grad.C și imediat reconstituit în 0,5 cc. A se vedea benzola.5.5.1.2. Purificarea finală pe un cartuș Diapak H (varianta 1) Soluția de benzen a fost aplicat la Diapak N. Balonul predvaritelnokonditsionirovanny cartuș conținând suhoyostatok, se spală de 2 ori cu 0,5 cu. vezi benzen și secvențial aplicate soluții pe o bobină Diapak N. Toate spălările spatrona otbrosit.Zearalenon eluate din cartuș Diapak H 4 cub. cm2 pe acid acetic procente în benzen și se evaporă la sec (doischeznoveniya miros de acid acetic), într-o temperatură isparitelepri rotativă nu mai mare de 50 de grade. C (Proba H). ostatoknemedlenno uscată reconstituită într-un solvent sootvetstvuyuschemkonechnomu cromatografică opredeleniyu.Zatem elut aflatoxinei B1 5 cc. 20 cm protsentnogoatsetonitrila în cartuș benzen și se evaporă până la uscare într-un pritemperature curent de azot nu mai mare de 40 de grade. C (Proba A). Solide nemedlennopererastvoritvrastvoritele corespunzătoare konechnomuhromatograficheskomu opredeleniyu.Ekvivalent greutatea probei luate pentru analiza aflatoxinei B1, MNR, - 4 greutate g.Ekvivalent de probă prelevată pentru analiza zearalenonei, MNR, - 4g.5.5.1.3. Purificarea finală pe un cartuș Diapak C (varianta 2) Potrivit pentru porumb și produse de soluție nee.Benzolny a fost aplicată în balonul predvaritelnokonditsionirovanny cartuș Diapak S. conținând suhoyostatok, se spală de 2 ori cu 0,5 cu. se referă la benzen și nanestirastvory Diapak cartuș C atunci când nivelul superior al porțiunilor anterioare soluție filtrapatrona. Toate spălările cu patronaotbrosit.Zearalenon Diapak eluat din cartuș cu 6 metri cubi. procente SM10 acetat de etil în benzen și se evaporă la sec (doischeznoveniya miros benzen) într-un evaporator rotativ pritemperature nu mai mare de 50 de grade. C (Proba H). Solidele nemedlennopererastvoritvrastvoritele corespunzătoare konechnomuhromatograficheskomu opredeleniyu.Zatem Diapak prin cartuș C 3 cc dor constant 5 procente acid acetic în benzen și 4 cc. sm25 la sută din hexan în aer. Toate eluate sunt aruncate. AflatoksinV1 eluat din cartuș 6 cu. cm 10 procente acetonă vdihlormetane. Eluatul se evaporă la sec sub un curent de azot, la o temperatură de 40 de grade nevyshe. C (Proba A). Solidele pererastvoritv imediat solvent final adecvat hromatograficheskomuopredeleniyu.Ekvivalent masa probei luate la analiza aflatoxinei B1, MNR, - greutate 4 g.Ekvivalent de probă prelevată pentru analiza zearalenonei, MNR, - 4g.5.5.2. Purificarea și concentrarea probei la opredeleniidezoksinivalenola și T-2 toksina5.5.2.1. purificare preliminară și cub de concentrare proby20. a se vedea extract pentru a trece prin cartuș Diapak AU-3 soskorostyu 2 - 3 picături pe secundă. Eluatul a fost colectat. Se clătește 5kub cartuș. cm extractant si filtru balon eluatele combinate vserdtsevidnuyu clătit 2 Filtru cub. cm acetonitril sobirayapromyvochnuyu lichid în balon. Rotatsionnomisparitele evaporă până la uscare, la o temperatură de aproximativ 60 - 70 de grade. C. Uparivaniepovtorit 2 - 3 ori cu adăugarea la balon 3 - cc 5. smpropanola-2 sau acetonitril până la dispariția picături de apă balon Nastenko (proba DT) .5.5.2.2. Curățarea finală pe cartuș Diapak NProbu DT dizolvat în 0,5 cc. cm de cloroform și aplicat napredvaritelno cartuș condiționat Diapak N. balon obmytesche cu de 2 ori 0,5 Cu. cm cloroform nanestirastvory și succesiv pe aceeași mandrină, pornind de fracțiunile de colectare conținând T 2toksin într-un balon de stripare. eluarea completă a T-2 toxină 2 cc de cloroform în balon. Eluatul se evaporă la sec pe rotatsionnomisparitele la 40 - 45 ° C. C și reconstituită vrastvoritele corespunzătoare final hromatograficheskomuopredeleniyu T-2 toxină (Proba T) .Dezoksinivalenol eluat din cartuș la celălalt topping cub kolbu6. vezi 20 de procente de acetonă în cloroform. Uparitdosuha elua pe un evaporator rotativ la o temperatură de 40 - 45 de grade. Ipererastvorit C într-o determinare sootvetstvuyuschemkonechnomuhromatograficheskomu solvent deoxinivalenolului (Proba D) Greutatea .Ekvivalent de probă prelevată pentru analiza deoxinivalenol, MNR, - greutate 4 g.Ekvivalent de probă prelevată pentru analiza T-2 toxină, MNR, - 4g.6. Aflatoxina M16.1. Echipamente, materiale, reactivi + -------------------------------------------- - + ----------------- + | IR evaporator rotativ sau unitatea 1m2 | TU 25-1173.102-84 || să se evapore în probe de azot la încălzirea | sau alte SRI. || aproximativ 40 de grade. C | || TSLN Centrifuga de tip 2 sau similar | W || 5-375-4171-73 aparat pentru a crea un vid de aproximativ -0.7 mm | || Hg. (Pompă cu jet de apă, vid ulei | || pompă, dispozitiv de aspirare medical) | || Dispozitiv cu vid pentru pregătirea probei (Ba | || Manifold-vid), cu proces receptoare vmesti- | || pod nu este mai mică de 10 de metri cubi. vezi | || Concentrându cartuș Diapak S16M, | TU 4215-002 - || Companie "BioKhimMak CT"| 05,451,931-94 || cartuș Concentrându Diapak C, | TU 4215-002 - || Companie "BioKhimMak CT"| 05451931-94 || Pensetă medicală, 15 cm | || Seringă capacitate de 10 sau 20 de metri cubi. A se vedea Luer | || Vas conic cu fund plat, cu dopuri, | || GOST 25336, cu o capacitate de 50 metri cubi. vezi | || flacoane ostrodonnye cu dopuri, cu interschimbabile | GOST 25336 || prin con directă 14/23, cu o capacitate de 10 sau de 25 de metri cubi. | Vezi || | || baloane în formă de pară, cu dopuri, cu interschimbabile | GOST 25336 || prin con directă 14/23, cu o capacitate de 25 de metri cubi. vezi | || cilindrii de măsurare, cu o capacitate de 50 metri cubi. A se vedea, | GOST 1770 || 2 celule, sau un tub de testare gradat vmestimos-. | || Tew 15 sau 20 de metri cubi. vezi | || Microseringă cu o capacitate de 100 de metri cubi. mm sau pipet- | GOST 20292 || ka in curs de executie de 4 sau 5, clasa 1 | || capacitate de precizie de 1 cu. vezi | || nesterilizat bumbac medicale, s / b | || Acetonitril pentru cromatografia de lichide, | W 6-09-14 - || OP-3, OFS, rectificat sau | 2167-84 || Acetonitril, 1 grad cooperativă "Kriohrom", | || r. Saint - Petersburg | || Acetona, OFS, OP 2, rectificat | || TU 6-09-3513-75 heptan, hexan, xv, sau eter de petrol (Mar- | TU 6-09-3375-78 || ki 70-100) , rectificat | || acid citric, 1-apă, grad analitic | GOST 3652-29 || clorură de sodiu, grad reactiv | || GOST 4233-66 Cloroform medical, sustinuta de peste CaCl | || 2 | || rectificat | || Sulfat de sodiu anhidru, grad reactiv | apă GOST 4166-76 || distilat | | + ---------------------------------------------- + - + 20% ---------------- acetonă în cloroform - 20 cu. acetonă dobavithloroform cm la 100 cu. se referă la vhloroforme totală sau 5% metanol - 20 cu. se adaugă 5 cm cub cloroform. cm de metanol pentru a aduce volumul soluției la 100 cc cloroform. sm.6.2. Metoda de preparare a M1 probAflatoksin eliminat din proba de lapte lichid prin propuskaniemee cartuș Diapak S16M. Fracțiunea care conține aflatoksinM1, eluat cu cloroform și cartuș, după uscare iuparivaniya, purificarea finală se efectuează pe cartuș eșantion Diapak S.Podgotovlennaya gata pentru cromatografie analizu.Aflatoksin M1 de smântână și lapte băuturi ekstragiruyuthloroformom în prezența clorurii de sodiu și acid citric pentru consistență cu MU N 4082-86 <*> и, после высушивания и упаривания,проводят окончательную очистку на патроне Диапак С.--------------------------------<*> Методические указания по обнаружению, идентификации иопределению содержания афлатоксинов в продовольственном сырье ипищевых продуктах с помощью высокоэффективной жидкостнойхроматографии. Утв. МЗ СССР 20.03.86 N 4082-86.Для проверки правильности проведения пробоподготовки иуточнения степени извлечения микотоксинов проводят анализ методомстандартной добавки в исходный экстракт.Время проведения пробоподготовки - 60 мин. Степень извлечения<*> - 80%. Относительное среднее квадратическое отклонение - 10%.--------------------------------<*> При снижении степени извлечения афлатоксина М1 см.Приложение 1.6.3. Подготовка концентрирующих патронов6.3.1. Концентрирующий патрон Диапак С16МСнять с патрона Диапак С16М заглушки и пропустить через него спомощью шприца последовательно по 5 куб. см ацетонитрила и воды.Заглушить оба конца патрона. Подготовленный таким образом патронможет храниться в течение суток при температуре не выше 25 град.C.Концентрирующий патрон Диапак С16М одноразового применения ирегенерации не подлежит.6.3.2. Концентрирующий патрон Диапак ССнять с патрона Диапак С заглушки и пропустить через него спомощью шприца 5 куб. см бензола и заглушить оба конца патрона.Подготовленный таким образом патрон может храниться в течениесуток при температуре не выше 25 град. C.Концентрирующий патрон Диапак С одноразового применения ирегенерации не подлежит.6.4. Подготовка проб молочных продуктов к анализу6.4.1. Подготовка, концентрирование и очисткапроб молокаПробу молока 50 куб. см центрифугировать на подходящемоборудовании в течение 5 мин. при 1000 об./мин. Для определенияафлатоксина М1 отобрать 20 куб. см супернатанта, избегая попаданияжира.Сухое молоко растворяется в соответствии с инструкцией илисоответствующим ТУ и обрабатывается, как описано выше.20 куб. см подогретой до 40 град. C подготовленной пробымолока пропустить через предварительно подготовленный патронДиапак С16М со скоростью 3 капли в секунду. Затем патрон промыть 5куб. см дистиллированной воды и высушить продуванием воздуха втечение 1 мин. Элюаты отбросить. Патрон промыть 10 куб. см гексанаи вновь высушить воздухом в течение 1 мин.Афлатоксин М1 элюировать 6 куб. см хлороформа. Собранный элюатпропустить самотеком через слой безводного сульфата натрия (3 куб.см). Колбу обмыть 1 куб. см хлороформа, и содержимое перенести натот же слой безводного сульфата натрия. Хлороформные растворысобрать (Экстракт М).6.4.2. Подготовка проб сметаны и кисломолочныхпродуктовВ коническую колбу вместимостью 250 куб. см помещают навеску20,0 г сметаны или 40 куб. см кисломолочного напитка. Затем тудаже вносят 10,0 куб. см водного раствора 2 г хлорида натрия и 0,24г лимонной кислоты и 100 куб. см хлороформа (все составные частипредварительно подогревают до температуры 35 - 38 град. C).Содержимое колбы встряхивают 2 - 3 мин., переносят в центрифужныестаканы и центрифугируют 15 мин. при 3000 - 4000 об./мин. Отделяютнижний хлороформный слой, высушивают над 10 г безводного сульфатанатрия, отфильтровывают, измеряют объем фильтрата (V ) и упариваютфдо 5 - 6 куб. см (Экстракт М).6.5. Окончательная очистка пробыЭкстракт М нанести на патрон Диапак С со скоростью 3 - 4 каплив секунду. Промыть сульфат натрия 1 куб. см хлороформа, и растворнанести на патрон Диапак С при достижении верхнего фильтра патронауровнем предыдущей порции раствора.Афлатоксин М1 элюировать с патрона 10 куб. см 20-процентногоацетона в хлороформе или 7 куб. см 5-процентного метанола вхлороформе. Элюат собрать и упарить досуха на ротационномиспарителе или в слабом токе азота при температуре не выше 40град. C. Сухой остаток немедленно перерастворить в растворителе,соответствующем конечному хроматографическому определению (ПробаМ).Эквивалент массы пробы молока, взятой на анализ афлатоксинаМ1, М , - 20 г.прЭквивалент массы пробы сухого молока рассчитывается поформуле:mМ = --- x 20, (6.1)прVгде:М - эквивалент массы пробы, взятой на анализ, г-прm - масса пробы сухого молока, г-V - объем воды для растворения пробы сухого молока, куб. см.Эквивалент массы пробы сметаны или кисломолочных напитков,взятой на анализ, рассчитывается по формуле:VфM = --- x m ,(6.2)пр 100пргде:M - эквивалент массы пробы, взятой на анализ, г-прV - объем фильтрата, куб. см-фm - масса (объем) пробы сметаны или кисломолочных напитков,прг (куб. см).7. Патулин7.1. Оборудование, материалы, реактивы+----------------------------------------------+-----------------+|Испаритель ротационный ИР-1М2 |ТУ 25-1173.102 - || |84 или др. ||Центрифуга типа ЦЛН-2 или аналогичная |ТУ 5-375-4171-73 ||Устройство для создания вакуума около -0,7 мм | ||рт.ст. (водоструйный насос, масляный вакуумный| ||насос, медицинский отсасыватель) | ||Вакуумное устройство для подготовки проб (ва- | ||куумный манифолд), с приемниками проб вмести- | ||мостью не менее 10 куб. см| ||Устройство для упаривания проб в токе азота | ||при нагревании около 40 град. C (желательно | ||суховоздушная баня) | ||Концентрирующий патрон Диапак П-3,|ТУ 4215-002 -||ЗАО "БиоХимМак СТ"|05451931-94 ||Концентрирующий патрон Диапак С, |ТУ 4215-002 -||ЗАО "БиоХимМак СТ"|05451931-94 ||Пинцет медицинский, 15 см | ||Колбы плоскодонные конические с пробками вмес-|ГОСТ 25336 ||тимостью 50 куб. см | ||Колбы остродонные с пробками с взаимозаменяе- |ГОСТ 25336 ||мым конусом 14/23 вместимостью 5, 10 или 25 | ||куб. см | ||Колбы грушевидные с пробками с взаимозаменяе- |ГОСТ 25336 ||мым конусом 14/23 вместимостью 25 куб. см | ||Пробирка градуированная вместимостью 15 или 20|ГОСТ 1770||куб. см | ||Цилиндры мерные вместимостью 10 и 50 куб. см, |ГОСТ 1770||2 кл. | ||Микрошприц вместимостью 100 куб. мм (или пи- |ГОСТ 20292 ||петка с делениями исполнения 4 или 5, 1-го| ||класса точности вместимостью 1 куб. см) | ||Бумажные фильтры обеззоленные марки ФОМ | ||Вата медицинская нестерилизованная, х/б | ||Ацетат цинка 2-водный, чда|ГОСТ 5823||Ацетонитрил для жидкостной хроматографии, |ТУ 6-09-14 - ||ОП-3 осч, ректифицированный |2167-84 ||Ацетон, осч, ректифицированный, ОП-2 |ТУ 6-09-3513-75 ||Бензол, хч, ректифицированный |ГОСТ 5955-75 ||Гексацианоферат II калия (калий железистосине-|ГОСТ 4207||родистый) 3-водный, хч| ||Гептан, гексан, хч или петролейный эфир |ТУ 6-09-3375-78 ||(фракция 70-100), хч, ректифицированный | ||Хлороформ, медицинский, выдержанный над CaCl ,| ||2 | ||ректифицированный | ||Этилацетат (этиловый эфир уксусной кислоты), |ГОСТ 22300-76||хч, выдержанный над Na CO и ректифицированный| || 2 3| ||Карбонат натрия, хч |ГОСТ 83-79 ||Сульфат натрия, безводный, хч |ГОСТ 4166-76 ||Вода бидистиллированная | |+----------------------------------------------+-----------------+1,5% карбоната натрия - 1,5 г карбоната натрия растворить в100 куб. см воды.15% этилацетата в бензоле - 15 куб. см этилацетата разбавитьбензолом до 100 куб. см.30% этилацетата в бензоле - 30 куб. см этилацетата разбавитьбензолом до 100 куб. см.Раствор Карреза I - 15,0 г гексацианоферата II калиярастворить в 100 куб. см воды.Раствор Карреза II - 30,0 г ацетата цинка растворить в 100куб. см воды.7.2. Способ подготовки пробМикотоксин патулин извлекают из проб осветленных соков инапитков пропусканием их через патрон Диапак П-3. Затем патулинэлюируют этилацетатом с патрона и после обработки растворомNa CO , высушивания, упаривания и перерастворения проводят2 3окончательную очистку на патроне Диапак С.Соки и напитки с мякотью и консистентные продукты разводятводой, осветляют растворами Карреза в соответствии с ГОСТом28038-89 <*>, фильтруют и экстрагируют патулин пропусканиемфильтрата через патрон Диапак П-3. Затем патулин элюируютэтилацетатом с патрона и после обработки раствором Na CO ,2 3высушивания, упаривания и перерастворения проводят окончательнуюочистку на патроне Диапак С.--------------------------------<*> Продукты переработки плодов и овощей. Метод определениямикотоксина патулина. ГОСТ 28038-89.Подготовленные пробы готовы к хроматографическому анализу.Для проверки правильности проведения пробоподготовки иуточнения степени извлечения патулина проводят анализ методомстандартной добавки в пробу.Время проведения пробоподготовки - 90 мин. Степень извлечения<*> - 60%. Относительное среднее квадратическое отклонение - 10%.--------------------------------<*> При снижении степени извлечения патулина см. Приложение 1.7.3. Подготовка концентрирующих патронов7.3.1. Концентрирующий патрон Диапак П-3Установить патрон Диапак П-3 вертикально в подходящееустройство для вакуумирования и открыть верхнюю крышку.Суспендировать сорбент при перемешивании стеклянной палочкой в 10куб. см бензола, дать отстояться сорбенту и пропустить при слабомвакууме, не допуская попадания воздуха, последовательно по 10 куб.см бензола и ацетона.Сохранив слой ацетона около 2 см, ввести пористый полимерныйфильтр (имеется в комплекте) и уплотнить его палочкой по верхнемуслоюсорбента.Затемпропустить оставшийся ацетон ипоследовательно по 10 куб. см экстрагента (см. п. 5.1) и смесиэкстрагент - вода (1:1), не допуская попадания воздуха на сорбентсо скоростью 2 - 3 капли в секунду.Сохранив слой последнего элюента около 2 см, отключить вакууми заглушить патрон сначала верхней крышкой, а затем (послепрекращения скапывания) и нижней заглушкой. Подготовленный такимобразом патрон может храниться в течение рабочего дня, а прислучайном пересыхании приводится в рабочее состояние прокачиванием10 куб. см смеси экстрагент - вода (1:1).Перед проведением пробоподготовки через патрон Диапак П-3пропустить 10 куб. см воды.Концентрирующий патрон Диапак П-3 многоразового применения иподлежит регенерации после проведения пробоподготовки по схеме егоподготовки, как указано выше.7.3.2. Концентрирующий патрон Диапак ССнять с патрона Диапак С заглушки и пропустить через него спомощью шприца 5 куб. см бензола и заглушить оба конца патрона.Подготовленный таким образом патрон может храниться в течениесуток при температуре не выше 25 град. C.Концентрирующий патрон Диапак С одноразового применения ирегенерации не подлежит.7.4. Подготовка проб к анализу7.4.1. Подготовка осветленных соков и напитковОтфильтровать пробу через плотный бумажный фильтр до получения20 куб. см фильтрата (Фильтрат П).7.4.2. Подготовка соков и напитков с мякотьюи консистентных продуктовНавеску пробы массой 10,0 г поместить в стеклянный стакан,смешать с небольшим количеством дистиллированной воды иколичественно перенести в мерную колбу вместимостью 50 куб. см. Вмерную колбу внести 6,0 куб. см раствора Карреза I и 6,0 куб. смраствора Карреза II. Содержание колбы довести дистиллированнойводой до метки, тщательно перемешать и отфильтровать в мерныйцилиндр через бумажный складчатый фильтр. Измерить объем фильтрата(Фильтрат П).7.5. Концентрирование и очистка пробы7.5.1. Концентрирование пробы на патроне Диапак П-3Весь объемФильтратаПнанестина предварительнокондиционированный патрон Диапак П-3 со скоростью 1 - 2 капли всекунду. Промыть патрон 5 куб. см бидистиллированной воды. Всесмывы отбросить.Патулин элюировать с патрона 10 куб. см этилацетата в колбуили мерную пробирку с пришлифованной пробкой, содержащую 5 куб. см1,5-процентного карбоната натрия, закрыть пробкой, интенсивноперемешать и дать отстояться. Декантировать верхний этилацетатныйслой, высушить его безводным сульфатом натрия (3 г) и перенести вколбу для упаривания. В колбу или пробирку, содержащую оставшийся1,5-процентный карбонат натрия, добавить еще 10 куб. смэтилацетата, перемешать и, после полного расслоения, высушиванияэтилацетатного слоя тем же сульфатом натрия, объединить его спервой порцией этилацетатного раствора в той же колбе дляупаривания. Операцию повторить с 5 куб. см этилацетата.Упарить этилацетатный раствор на ротационном испарителе притемпературе не выше 40 град. C до объема около 0,5 куб. см (неупаривать досуха!). Количественно перенести пробу в сердцевиднуюколбу вместимостью не более 5 куб. см или в полимерную пробиркутипа Эппендорф, промыв предыдущую отгонную колбу 0,5 куб. смэтилацетата, и присоединить к упариваемой пробе. Пробу упарить втоке азота при температуре не более 40 град. C в суховоздушнойбане до 0,5 куб. см и добавить к ней 2,5 куб. см бензола.7.5.2. Окончательная очистка пробы на патроне Диапак СБензол - этилацетатный раствор пропустить через патрон ДиапакC со скоростью 1 - 2 капли в секунду. Обмыть колбу еще 0,5 - 1,0куб. см 15-процентного этилацетата в бензоле и нанести на патрон.Все смывы отбросить.Патулин элюировать с патрона 6 куб. см 30-процентногоэтилацетата а бензоле, собирая элюат в сердцевидную отгоннуюколбу. Элюат упарить досуха в токе азота при температуре не выше40 град. C в суховоздушной бане.Внимание! После упаривания пробу немедленно перерастворить в100 мкл хлороформа, охлажденного до 0 - 5 град. C (для ТСХ -анализа) или в 100 - 500 мкл охлажденной до 5 - 8 град. Cбидистиллированной воды, подкисленной до pH 4,0 уксусной кислотой(для ВЭЖХ - анализа) и быстро охладить до 0 - 5 град. C (Проба П).Хранить Пробу П в холодильнике не более 1 ч.Эквивалент массы пробы осветленных соков и напитков, взятой наанализ, М , - 20 г, соков и напитков с мякотью и консистентныхпрпродуктов определяется по формуле:VФр.ПМ = ----- x m , (7.1)пр 50 пргде:М - эквивалент массы пробы, взятой на анализ, г-прV - объем Фракции П, куб. см-Фр.Пm - масса пробы соков и напитков с мякотью или консистентныхпрпродуктов, г.Приложение 1РЕКОМЕНДУЕМАЯ МЕТОДИКАИСПЫТАНИЙ КОНЦЕНТРИРУЮЩИХ ПАТРОНОВ ДИАПАКВведениеКаждая партия концентрирующих патронов Диапак П-3, ДиапакС16М, Диапак Н, Диапак С, а также партии сорбентов Диасорб А иДиасорб АУ подвергаются выходному контролю в соответствии сТУ 4215-002-05451931-94 наихсоответствиетребованиям,предъявляемым к специализированным патронам для твердофазнойэкстракции микотоксинов. Этим метрологически обеспечивается ихпроизводство.Применение настоящих испытаний рекомендуется проводить вследующих случаях:- еслирезультатпроверкиправильности проведенияпробоподготовки методом стандартной добавки не соответствуетнормативу коэффициента извлечения-- если патроны Диапак подвергались неправильному хранению илинарушена целостность упаковки-- в случаях дополнительного сверхнормативного использованиярегенерируемых патронов (Диапак Н, Диапак П-3).Приведенные ниже методики проверки патронов Диапак позволяютвыявить ошибку по стадиям пробоподготовки. При соответствиихарактеристик патронов Диапак нормативным требованиям следуетискать ошибки в правильности подготовки растворителей иприготовлениирастворов,контроле условий упаривания иперерастворения анализируемых проб.Если среди стадий подготовки пробы присутствует подготовка напатроне Диапак С, рекомендуется начинать анализ возможной потерицелевого компонента именно с этого патрона. Это связано счувствительностьюсиликагеляк качеству используемыхрастворителей, и прежде всего с содержанием в них воды. Такаяспецифика сильной зависимости активности патрона Диапак С отусловий его хранения и качества используемых растворителей можетпотребовать оптимизации количества элюента, используемого приработе с этими патронами в конкретной лаборатории.Общая частьНастоящая Методикапредназначенадляметрологическогообеспечения применения патронов Диапак в анализе микотоксинов иустанавливает процедуру их испытаний. Критерием качества патроновДиапак является соответствие результатов испытаний нормативамкоэффициента извлечения, K , в модельных экспериментах вRсоответствии со схемами элюирования, приведенными в разделах 5 - 7настоящих Методических указаний.Коэффициент извлечения рассчитывают по формуле:C` x KdK = ------- x 100, (1)R Cгргде:K - коэффициент извлечения данных микотоксинов, %-RC` - концентрация данного микотоксина, найденная в результатеиспытания, мкг/куб. см (или S` площадь хроматографического пика,соответствующая концентрации C`)-C - концентрация того же микотоксина, используемая длягрградуировки хроматографической системы, мкг/см (или Sплощадьгрхроматографического пика, соответствующая концентрации C )-грK - коэффициент разведения образца.dЗа окончательное значение K принимаетсясреднееRарифметическое результатов двух параллельных испытаний, еслиабсолютное расхождение между ними не превышает 5%.Испытания проводятся относительным методом по схеме "введено -найдено", поэтому специальных требований к стандартным образцаммикотоксинов не предъявляется.1. Испытание патронов Диапак А-3 иДиапак П-3 по афлатоксину В1 и зеараленонуИспытание патронов Диапак А-3 проводится совместно с ДиапакП-3 из-за низких концентраций афлатоксина В1 и зеараленона, атакже их температурной лабильности, приводящей к невозможностиконцентрирования упариванием. Патрон Диапак П-3 может быть испытаннезависимо от Диапак А-3, что рекомендуется выполнять потребителючерез каждые 10 проб после соответствующей регенерации по п.5.3.3.Приготовить из имеющихся стандартных растворов микотоксинов1,0 куб. см испытательной смеси, содержащей 0,4 мкг афлатоксина В1и 4,0 мкг зеараленона в произвольной смеси бензола и ацетонитрила.Аликвоту смеси объемом 0,25 куб. см перенести в сердцевиднуюколбу, и упарить растворители досуха в токе азота при температуре40 град. C. Немедленно перерастворить остаток в 0,25 куб. смрастворителя, соответствующего конечному хроматографическомуопределению. Ориентировочные значения концентраций: 0,4 мкг/куб.см - для афлатоксина В1 и 4,0 мкг/куб. см - для зеараленона.Ввести раствор не менее двух раз в хроматографическую систему ирассчитать среднее арифметическое значение площадей пиков каждогоиз микотоксинов, C (S ).гр грПодготовить патроны Диапак А-3 и Диапак П-3 в соответствии сп. п. 5.3.1 и 5.3.3.Вторую аликвоту смеси объемом 0,25 куб. см упарить аналогично,перерастворить в 25 мл экстрагента (смеси ацетонитрил - вода -84:16) и нанести на патрон Диапак А-3 в соответствии с п. 5.1.1.Полученные 20 мл элюата сконцентрировать на патроне Диапак П-3 всоответствии с п. 5.1.1. Концентратперерастворитьипроанализировать аналогично градуировочному эксперименту, получивзначение C`(S`).Рассчитать значение K по формуле (1). Значение K = 1,25.R dКоэффициент извлечения, K , должен быть не менее 90% - дляRафлатоксина В1 и 85% - для зеараленона.При испытании одного патрона Диапак П-3 вторую аликвотуобъемом 0,25 куб. см после упаривания перерастворить в 40 мл смесиэкстрагент - вода (1:1) (смеси ацетонитрил - вода 42:58) исконцентрировать в соответствии с п. 5.1.1. Рассчитать значениеK , принимая K = 1,00. Коэффициент извлечения, K , должен быть неRd Rменее 95% - для афлатоксина В1 и 95% - зеараленона.2. Испытание патронов Диапак АУ-3по дезоксиниваленолу и Т-2 токсинуПриготовить из имеющихся стандартных растворов микотоксинов1,0 см испытательной смеси, содержащей по 20 мкг дезоксиниваленолаи Т-2 токсина в произвольной смеси бензола и ацетонитрила.Аликвоту смеси объемом 0,25 куб. см перенести в сердцевиднуюотгонную колбу и упарить досуха на ротационном испарителе притемпературе 40 - 50 град. C. Перерастворить остаток в 0,25 куб. смрастворителя, соответствующего конечному хроматографическомуопределению. Ориентировочное значение концентраций: 20 мкг/куб. см- для дезоксиниваленола и Т-2 токсина. Для градуировкихроматографической системы ввести раствор не менее двух раз ирассчитать среднее арифметическое значение площадей пиков каждогоиз микотоксинов, C (S ).гр грПодготовить патрон Диапак АУ-3 по п. 5.3.2.Вторую аликвоту смеси объемом 0,25 куб. см упарить аналогично,перерастворить в 20 мл экстрагента (смеси ацетонитрил - вода84:16) и нанести на патрон Диапак АУ-3, в соответствии с п. 5.5.2.После упаривания досуха остаток перерастворить и проанализироватьаналогично градуировочному эксперименту, получив значение C` (S`).Рассчитать значение K по формуле 1. Значение K = 1,00.R dКоэффициент извлечения K должен быть не менее 95% - дляRдезоксиниваленола и Т-2 токсина.3. Испытания патрона Диапак НКонцентрирующие патроны Диапак Н являются универсальнымирегенерируемыми патронами для окончательной очистки афлатоксинаВ1), зеараленона, дезоксиниваленола и Т-2 токсина, поэтомуиспытание рекомендуется выполнять через каждые 10 проб послеочередной регенерации по п. 5.3.4. Патроны Диапак Н обеспечиваюттонкую очистку указанных микотоксинов с высокими метрологическимихарактеристиками (K не менее 90%), поэтому значения K менее 90%R Rчаще всего свидетельствуют об ошибках в приготовлении элюентов илио недостаточной чистоте растворителей.3.1. Испытание по афлатоксину В1 и зеараленонуСухой остаток упаренной второй аликвоты испытательной смеси поп. 1 немедленно перерастворить в 0,5 мл бензола и нанести поусловиям п. 5.1.2 на подготовленный (см. п. 5.3.4) патрон ДиапакН. После элюирования и упаривания Пробы З и Пробы А немедленноперерастворить их в 0,25 куб. см растворителя, соответствующегоконечному хроматографическому определению, и проанализироватьаналогично градуировочному эксперименту по п. 1, получив значениеC (S ) и C`(S`) по каждому из микотоксинов.гр грРассчитать значение K по формуле (1). Значение K = 1,00.R dКоэффициент извлечения K должен быть не менее 90% - дляRафлатоксина В1 и зеараленона.3.2. Испытания по дезоксиниваленолу и Т-2 токсинуСухой остаток упаренной второй аликвоты испытательной смеси поп. 2 перерастворить в 0,5 мл хлороформа и нанести по условиям п.5.1.2 на подготовленный патрон Диапак Н. После элюирования иупаривания Пробу Д и Пробу Т перерастворить в 0,25 куб. смрастворителя, соответствующего конечному хроматографическомуопределению, и проанализировать аналогично градуировочномуэксперименту по п. 2, получив значения C (S ) и C`(S`) погр гркаждому из микотоксинов.Рассчитать значения K по формуле (1). Значение K = 1,00.R dКоэффициент извлечения Kдолжен быть не менее 90% дляRдезоксиниваленола и Т-2 токсина.4. Испытания патрона Диапак СКонцентрирующие патроны Диапак С являются одноразовымипатронами для окончательной очистки афлатоксина В1 и зеараленона,а также афлатоксина М1 и патулина. Патроны Диапак С обеспечиваюттонкую очистку указанных микотоксинов с хорошими метрологическимихарактеристиками (K = 75 - 90%). Для достижения указанныхRхарактеристик необходимо установить оптимальный объем элюированиямоделированием порционного элюирования (1 - 3 порции по 3 мл)целевых фракций в ходе настоящих испытаний.Оптимальную схему элюирования, т.е. необходимое число порцийпо 3 мл, потребитель устанавливает по достижению суммарногокоэффициентаизвлечениянениже указанного норматива.Установленный объем элюирования подлежит проверке при смене партиирастворителей и их смесей, используемых для тонкой очисткимикотоксинов.4.1. Испытания по афлатоксину В1 и зеараленонуПодготовить патрон Диапак С в соответствии с п. 5.3.5.Сухой остаток упаренной второй аликвоты испытательной смеси поп. 1 немедленно перерастворить в 0,5 мл бензола и нанести напатрон Диапак С в соответствии с п. 5.1.3. После элюирования ираздельного упаривания трех фракций Пробы З и трех фракций Пробы Анемедленно перерастворить их в 0,25 куб. см растворителя,соответствующего конечному хроматографическому определению, ипроанализировать аналогично градуировочному эксперименту по п. 1,получив по три значения Sи одному S` по каждому изгрмикотоксинов.Рассчитать K по формуле (1) для каждой из трех фракций Проб ЗRи А K = 1,00. Суммарный коэффициент извлечения K должен быть неdRменее 90% - для афлатоксина В1 и 85% - для зеараленона. Определитьминимальновозможноечисло последовательных фракций,обеспечивающее суммарный K не ниже норматива. Найденное числоRфракций (от 1 до 3) и определяет оптимальный объем элюированияданных микотоксинов с патрона Диапак С данной партии сприготовленными растворителями.Если значение суммарного K меньше нормативного значения, тоRэто свидетельствует об ошибках в приготовлении элюирующих смесейи/или о недостаточной чистоте растворителей, в особенности с точкизрения содержания в них воды.4.2. Испытание по афлатоксину М1Приготовить из имеющегося стандартного раствора 1,0 куб. смиспытательной смеси, содержащей 0,1 мкг афлатоксина М1 впроизвольной смеси бензола и ацетонитрила. Аликвоту смеси объемом0,25 куб. см перенести в сердцевидную колбу и упарить раствор втоке азота при температуре 40 град. C. Немедленно перерастворитьостаток в 0,25 - 1,0 куб. см растворителя, соответствующегоконечному хроматографическомуопределению.Ориентировочныезначения концентраций афлатоксина М1 0,025 - 0,1 мкг/куб. смсоответственно. Для проведения градуировочного эксперимента ввестираствор не менее двух раз в хроматографическую систему ирассчитать среднее арифметическое значение площадей пиковафлатоксина М1, C (S ).гр грВторую аликвоту смеси объемом 0,25 куб. см упарить, какописано выше, перерастворить в 6 мл хлороформа и нанести вусловиях п. 6.5 на подготовленный (см. п. 6.3.2) патрон Диапак С.После элюирования и раздельного упаривания трех последовательныхфракций Пробы М немедленно перерастворить их в 0,25 - 1,0 куб. смрастворителя, соответствующего конечному хроматографическомуопределению, и проанализировать аналогично градуировочномуэксперименту, получив три значения C`(S`) по афлатоксину М1.Рассчитать K по формуле (1) для каждой их трех фракций ПробыRМ K = 1,00. Суммарный коэффициент извлечения K для афлатоксинаdRМ1 должен быть не менее 85%. Найти оптимальный объем элюированияафлатоксина М1 с патрона Диапак С по алгоритму, приведенному в п.4.1. Там же приведен алгоритм поиска ошибок.4.3. Испытание по патулинуПриготовить из имеющегося стандартного раствора 1,0 куб. смиспытательной смеси, содержащей 4,0 мкг патулина в произвольнойсмеси бензола и ацетонитрила. Аликвоту смеси объемом 0,25 куб. смперенести в сердцевидную колбу и упарить растворитель в токе азотапри температуре 35 - 40 град. C. Немедленно перерастворить остатокв 0,25 куб. см растворителя, соответствующего конечномухроматографическомуопределению.Ориентировочноезначениеконцентрации патулина: 4,0 мкг/куб. см. Для проведенияградуировочного эксперимента ввести раствор не менее двух раз вхроматографическую систему и рассчитать среднее арифметическоезначение площади пика патулина, C (S ).гр грВторую аликвоту смеси объемом 0,25 куб. см упарить аналогично,перерастворить в 3 мл 15-процентного этилацетата в бензоле инанести в условиях п. 7.5.2 на подготовленный (см. п. 7.3.2)патрон Диапак С. После элюирования и раздельного упаривания трехпоследовательных фракций Пробы П немедленно перерастворить их в0,25 куб. смрастворителя,соответствующегоконечномухроматографическому определению, и проанализировать аналогичноградуировочному эксперименту по п. 4.3, получив три значенияC`(S`) по патулину.Рассчитать значение K по формуле (1) для каждой из трехRфракций Пробы П. K = 1,00. Суммарный коэффициент извлечения KdRдля патулина должен быть не менее 75%. Найти оптимальный объемэлюирования патулина с патрона Диапак С по алгоритму, приведенномув п. 4.1. Там же приведен алгоритм поиска ошибок.5. Испытание патрона Диапак П-3 по патулинуВторую аликвоту испытательной смеси по п. 4.3 объемом 0,25куб. см после упаривания перерастворить в охлажденной до 5 - 8град. C воде, подкисленной уксусной кислотой до pH 4,0, исконцентрировать в условиях п. 7.5.1 на подготовленном (см. п.7.3.1) патроне Диапак П-3. После элюирования и высушивания упаритьэтилацетатный экстракт досуха в токе азота при температуре 35 - 40град. C, немедленно перерастворить в 0,25 куб. см растворителя,соответствующего конечному хроматографическому определению, ипроанализировать аналогично градуировочному эксперименту по п.4.3, получив значения C (S ) и C`(S`).гр грРассчитать значение K по формуле (1). Значение K = 1,00.R dКоэффициент извлечения K для патулина должен быть не менее 80%.R6. Испытание патрона Диапак С16М по афлатоксину М1Вторую аликвоту испытательной смеси по п. 4.2 объемом 0,25куб. см после упаривания перерастворить в 20 мл 5-процентногоацетонитрила в воде и нанести в соответствии с п. 6.4.1 наподготовленный по п. 6.3.1 патрон Диапак С16М. После элюирования ивысушивания упарить хлороформный экстракт М на ротационномиспарителе при температуре не выше 40 град. C, немедленноперерастворить его в 0,25 - 1,0 куб. см растворителя,соответствующего конечному хроматографическому определению, ипроанализировать аналогично градуировочному эксперименту по п.4.2, получив значения C (S ) и C`(S`) для афлатоксина М1.гр грРассчитать K по формуле (1) K = 1,00. Коэффициент извлечения,R dK , по афлатоксину М1 должен быть не менее 95%.
legislație sanitară

Moscova, Centrul Federal pentru Inspecția sanitară Ministerul Sănătății din Rusia, 1999UtverzhdayuGlavny gosudarstvennyysanitarny vrachRossiyskoy FederatsiiG.G.ONISchENKO23 octombrie 1999 godaData introducere în ianuarie 2000 goda4.1 -1. METODE DE CONTROL. CHIMICA FAKTORYOPREDELENIE MASS KONTSENTRATSIIMIKOTOKSINOV în materii prime alimentare și PRODUKTAHPITANIYA. PREGĂTIREA PROBEI METODOMTVERDOFAZNOY EKSTRAKTSIIMETODICHESKIE UKAZANIYAMUK 4.1.787-991. Dezvoltat de către Centrul Federal Sanitară de Stat și epidemiologică MinzdravaRossii (VB Skachkov, IV Bragin, Regina NV) și CJSC"BioKhimMak CT" (Cercetator principal Vasiyarov GG, GS angajat starshiynauchny Alexeev, cercetător principal OsokinD.M., Doctor în științe chimice Staroverov SM.). 2. Aprobat și pus în aplicare șef gosudarstvennymsanitarnym doctor al Federației Ruse din 23 octombrie 1999 D.3. Vpervye.1 introdus. Scopul și domeniul de aplicare mostre primeneniyaNastoyaschie Metodicheskieukazaniyaustanavlivayutsposobypodgotovki de materii prime alimentare și produktovmetodom alimentară fază solidă de extracție posleduyuschegohromatograficheskogo pentru studii de analiză și securitate micotoxine sunt dlyaprovedeniyalaboratornyh instituții pischevoyproduktsii gossanepidsluzhby din Federația Rusă, precum dlyapredpriyaty și instituțiile implicate în materii prime de control al calității iissledovaniya alimentare și produse alimentare pentru consistență cu SanPiN 2.3.2.560-96 "Cerințe de igienă Kkachestvu și siguranța materiilor prime alimentare și pischevyhproduktov" și acreditat în conformitate cu poryadke.2 stabilite. Metoda de preparare a probelor de probPodgotovka cuprinde următoarele secțiuni: - obiect de testare extracție furnizează extract poluchenieedinogo conținând toate micotoxinele normalizat obiect vdannom de SanPiN 2.3.2.560-96-- extract de preparare a probei prin vklyuchayuschayapredvaritelnuyuochistku extracție fază solidă, purificarea kontsentrirovanieiokonchatelnuyu pe concentrarea cartușelor Diapak.3 . Cerințe bezopasnostiPri reactivilor solvenții și veschestvamineobhodimo sunt conforme cu cerințele de siguranță stabilite dlyaraboty substanțe toxice, corozive și inflamabile Pogost 12.1.005-88.4. Condițiile de preparare probProtsessy care efectuează prepararea și procesarea probelor soluție transportate condiții vnormalnyh la o temperatură ambiantă de 18 - 22grad. C.5. Aflatoxinei B1 (AP-B1), zearalenona (ZON), deoxinivalenolul (DON) și T-2 toxină (T-2) 5.1. Echipamente, materiale, reaktivyTablitsa 1 + ------------------------------------ + ------ --- + --------- + --- + --- + | Echipamente, materiale, reactivi | AT-B1 | ZON | DON | 2 || T și soluții + ---- + ---- + ---- + ---- + | ||| 1 | 2 | 1 | 2 | | ||| var |. Var |. Var |. Var. | | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | tip de probe, agitator | + || AVU-6C TU 64-1-2451-78 sau magnetice | || agitator mecanic sau -magnetic | | + ------------------------------------ + ----------- + ---------------- | balanță analitică cu o precizie de | + || cântărit 0,01 g +/- | | + ------------------------------------ + ----------- + ---------------- | tipul Mill "ciclon" QC-114 | + | + ------------------------------------ + ---------- ----------------- + | evaporator rotativ (TS-1m2, | + || W sau 25-1173.102-84 al.) | | + ------------------------------------ + ----------- + ---------------- | dispozitiv A pentru vacuum | + || aproximativ -0.7 mmHg (Waterjet | || pompă, ulei pompă cu vid | || hotei Medical) | | + ------------------------------------ + ----------- + ---------------- | dispozitiv cu vacuum pentru formare | + || probe (colectoare de vid), cu receptoare | || capacitate de porecle de încercare de cel puțin | || 10 cu. vezi | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | dispozitiv pentru evaporarea probe | + | + | - | - | - | - || curent de azot sub încălzire în jurul ||||| | || 40 de grade. C (aer uscat este de dorit ||||| | || Baie) ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | cartuș Concentrându Diapak A-3, | + | + | + | + | + | + || TU 4215-002-05451931-94, ||||| | companie || "BioKhimMak CT" ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | cartuș Concentrându Diapak AU-3, | - | - | - | - | + | + || TU 4215-002-05451931-94, ||||| | companie || "BioKhimMak CT" ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | Concentrându cartuș Diapak P-3, | + | + | + | + | - | - || TU 4215-002-05451931-94, ||||| | companie || "BioKhimMak CT" ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | cartuș Concentrându Diapak H, | + | - | + | - | + | + || TU 4215-002-05451931-94, ZAO ||||| | ||"BioKhimMak CT" ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | cartuș Concentrându Diapak C, | - | + | - | + | - | - || TU 4215-002-05451931-94, ||||| | companie || "BioKhimMak CT" ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | Pensetă medicală, 15 cm | + | + ------------------------------------ + ---------- ----------------- + | spatulă de metal sau porțelan | + || lingură | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | baloane cu fund plat conic | + | + | + | + | - | - || dopuri cu o capacitate de 50 de metri cubi. cm ||||| | || GOST 25336 ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | fundul plat-flacoane conice | + || (Erlenmeyer) vmestimos- congestie | || Tew 250 sau 300 cc. cm | || GOST 25336 | | + ------------------------------------ + ----------- + ---------------- | balon Buchner, cu o capacitate de 500 de metri cubi. | + || A se vedea | | + ------------------------------------ + ----------- + ---------------- | Pâlnie capacitate Bunsen | + || 200 cu. vezi | | + ------------------------------------ + ----------- + ---------------- | Capacitatea Pâlnie de separare | + || 250 cu. vezi GOST 25336 | | + ------------------------------------ + ----------- + | flacoane ---------------- ostrodonnye cu dopuri de pe | + || GOST 25336 cu konu- interschimbabile | || Somnul 14/23 capacitate de 5, 10 | || 25 cu. vezi | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | baloane în formă de pară, cu dopuri de pe | + | + | + | + | - | - || GOST 25336 cu interschimbabil konu- ||||| | || Somnul 14/23 capacitate de 10 si 25 de metri cubi. ||||| | || vezi ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | cilindrii de măsurare, cu o capacitate de 25, 50, | + || 100 cu. Celulele cm 2, în conformitate cu GOST 1770 | | + ------------------------------------ + ----------- + ---------------- | microseringă cu o capacitate de 100 de metri cubi. mm | + || (sau pipetă gradat GOST | || 20292 executarea de 4 sau 5, 1 Clasificare |. || sa capacitate de precizie de 1 cc) | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | hârtie de filtru (dens, îngust || - || - | + | + || koporistaya filtrare lent ||||| | | | tipul de sedimente subțire "albastru ||||| | || alimentare") ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | nesterilizat bumbac medicale, | + || x / b | | + ------------------------------------ + ----------- + ---------------- | acetonitril pentru cromatografie în fază lichidă | + || grafie, OP-3 OFS TU | || 6-09-14-2167-84, rectificat | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | Acetona, puritate ridicată, în conformitate cu TU 6-09-3513-75 | - | + | - | - | - | - || OP-2, rectificat ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | benzen, grad reactiv, în conformitate cu GOST 5955-75, vyder- | + | + | + | + | - | - || zhanny peste Na SO, rectificat ||||| | || 02 aprilie ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | heptan, hexan, XQ, TU | + | + | + | + | - | - || 6-09-3375-78 sau eter de petrol ||||| | || (fracția 70-100), grad reactiv, ||||| | Rectificată || ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | 2-propanol (alcool izopropilic), | - | - | - | - | + | + || xq, TU 6-09-402-75, ||||| | Rectificată || ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | Acid acetic glacial, xv, în | + | + | + | + | - | - || GOST 61-75 ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | cloroform, medicale, susținută | - | - | - | - | + | + || peste CaCl, rectificat ||||| | || 2 ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | clorură de metilen (diclormetan), | + | + | - | - | - | - || sustinut peste CaCl, ||||| | || 2 ||||| | Rectificată || ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | dietil eter, susținută peste | - | + | - | - | - | - || NaOH, rectificat ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | acetat de etil (acetat de etil || + || - || - || Acid), grad reactiv, în conformitate cu GOST 22300-76, || ||| | || susținută pe Na CO și rektifitsi- ||||| | || 03 februarie ||||| | Rowan || ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | sulfat de sodiu, grad anhidru, reactiv, a | + | + | + | + | - | - || GOST 4166-76 ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | clorură de sodiu, grad reactiv, în conformitate cu GOST 4233-77 | + | + ------------------------------------ + ---------- ----------------- + | apă distilată | + | + ------------------------------------ + ---------- ----------------- + | extractant - 84% acetonitril în vO | + || de, 840 de metri cubi. A se vedea acetonitril dovo- | || dyatsya la 1 litru de apă sau polucha- | || etsya prin distilare cu soluție apoasă de apă | || dar - amestec acetonitril (1: 4) | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | 33% benzen în acetonitril - se amestecă | + | + | + | + | - | - || 30 cu. A se vedea, benzen și 60 de metri cubi. A se vedea, acetonă ||||| | || tonitrila (1: 2) ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | 20% acetonitril în benzen - 20 cu |. + | - | - | - | - | - || cm acetonitril se diluează benzen ||||| | || până la 100 de metri cubi. vezi ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | 2% acid acetic în benzen - 2 | - | - | + | - | - | - || cu. vezi acid acetic diluat ||||| | || benzen până la 100 metri cubi. vezi ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | 5% acid acetic în benzen - 5 | - | + | - | - | - | - || cu. vezi acid acetic diluat ||||| | || benzen până la 100 metri cubi. vezi ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | 10% acetat de etil în benzen - 10 cu. | - | + | - | + | - | - acetat || cm diluat cu benzen la ||||| | || 100 cu. vezi ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | 25% hexan în aer - 25 cu. vezi | - | + | - | - | - | - || hexan diluat cu dietil eter ||||| | || până la 100 de metri cubi. vezi ||||| | | + ------------------------------------ + ---- + ---- + - --- + ---- + --- + --- + | 10% acetonă în diclormetan - 10 cu. | - | + | - | - | - | - || diluați acetonă cm 
Distribuiți pe rețelele sociale: 

 
 
înrudit
 
Drept medical: drept, documente, responsabilități, reguli, acte.
Drept medical: drept, documente, responsabilități, reguli, acte.
Drept medical: drept, documente, responsabilități, reguli, acte.
Drept medical: drept, documente, responsabilități, reguli, acte.
Drept medical: drept, documente, responsabilități, reguli, acte.
Drept medical: drept, documente, responsabilități, reguli, acte.
Drept medical: drept, documente, responsabilități, reguli, acte.
Drept medical: drept, documente, responsabilități, reguli, acte.
Drept medical: drept, documente, responsabilități, reguli, acte.
Drept medical: drept, documente, responsabilități, reguli, acte.
Drept medical: drept, documente, responsabilități, reguli, acte.
Drept medical: drept, documente, responsabilități, reguli, acte.
Drept medical: drept, documente, responsabilități, reguli, acte.
Drept medical: drept, documente, responsabilități, reguli, acte.
Drept medical: drept, documente, responsabilități, reguli, acte.
Drept medical: drept, documente, responsabilități, reguli, acte.
Drept medical: drept, documente, responsabilități, reguli, acte.
Drept medical: drept, documente, responsabilități, reguli, acte.
Drept medical: drept, documente, responsabilități, reguli, acte.
Drept medical: drept, documente, responsabilități, reguli, acte.
Drept medical: drept, documente, responsabilități, reguli, acte.