Studiul celulelor stem. Principalele metode de cercetare de celule stem

Diferențierea celulelor hematopoietice

Video: Shukhrat Mitalip, om de știință nostru în Statele Unite clonat cu succes celule stem

Ultima, prin definiție, must posedă cel puțin două proprietăți primare: capacitatea de auto-reînnoire, comparabil cu durata de viață a întregului organism, și capacitatea de a se diferenția în elemente de celule mature.

Pentru o lungă perioadă de timp problema cercetare celula stem purtau speculative. Studiul experimental a devenit posibilă numai după stabilirea metodei de clonare a celulelor hematopoietice în splina șoarecilor iradiate.

Celule de măduvă osoasă injectat șoareci în mod fatal iradiat într-o cantitate mică să cadă în diferite organe formatoare de sânge, în special în splină. Proliferarea celulelor hematopoietice introduse în acesta duce la formarea de colonii) (focare de hematopoieză, situate de-a lungul splinei discret și bine vizibile macroscopic sub formă de noduli care conțin 7-10 zile după transplant mai multe milioane de celule hematopoietice.

În medie, Transplantul de 104 celule măduvă osoasă singenică format una - trei colonii. Acest lucru ridică o cheie pentru orice metodă de clonare întrebarea dacă o colonie este format dintr-o celulă hematopoietică sau în crearea sa au participat populație de celule, o componentă a populației transplantat. Rezultate (Till, McCulloch, 1961) că odată cu creșterea numărului de celule transplantate crește liniar cu numărul de colonii. Acest fapt este un argument serios în favoarea originii clonale a coloniilor.

Video: TV Show Marina Astvatsaturyan "Medicina în context", tema: "Stem Cells"

Cu toate acestea, numai faptul de există o relație liniară între numărul de celule administrate și numărul de colonii în curs de dezvoltare nu este suficientă pentru a dovedi originea coloniilor clonale. Într-adevăr, în cazul în care formarea coloniei cooperează două sau mai multe tipuri de celule, dintre care doar unul este limitat în suspensia de celule hematopoietice, iar în acest caz, se va observa o relație liniară între numărul de celule injectate și numărul de colonii emergente.

natura clonală a coloniilor în splină a fost demonstrată prin metoda markerilor de radiație (Becker e. a., 1963). In acest scop, șoarecii au fost iradiate la o doză de 250 rad, ele au fost transplantate doza mare de măduvă osoasă singenică și apoi iradiat cu o a doua doză de 650 rad. În aceste condiții, șoarecele-destinatarii au primit o doză totală de 900 rad, care este inactivată aproape complet propriile lor celule formatoare de colonii, în timp ce celulele transplantate obține doza de radiații mai mică (650 rad), iar unele dintre ele au supraviețuit.

În același timp, o mare probabilitate că iradierea la această celulă doză deși supraviețuiește, dar poartă orice aberație cromozomială stabil (marker de cromozomi), permițând acesteia și descendenții săi identifică. Analiza Karyological a arătat că majoritatea coloniilor examinate în care cromozom marker detectabil, aceeași aberație efectuate toate celulele care se divid acestei colonii. Deoarece apariție independentă aceeași aberație chiar și în doar două celule este statistic foarte puțin probabil aceste fapte arată că colonia (sau cel puțin cele mai multe dintre ele) sunt descendenți ai unui celule colonie de clone. Astfel, colonie a produs o celulă sursă (colonie unitate în selezenke- CFU de formare).